Lipofectamine™ 2000轉染試劑操作要點總結
Lipofectamine™ 2000 轉染試劑是一種常用的細胞轉染試劑,由陽離子脂質和中性脂質混合而成。其主要作用是幫助外源DNA、RNA或蛋白質等分子有效地進入細胞內,實現基因轉染或蛋白質轉染。在科研領域,Lipo2000廣泛應用于基因轉染和siRNA轉染實驗,用于基因表達調控、基因沉默等研究。此外,它也可用于蛋白質轉染,將外源蛋白質引入細胞內進行功能研究。在使用時,需注意根據不同的細胞類型和待轉染分子優化濃度和轉染時間,避免過高濃度或時間導致的細胞毒性。正確使用Lipo2000轉染試劑可以確保實驗的準確性和可靠性,為細胞生物學和分子生物學研究提供重要支持!那么以下內容,我們將為您匯總資深用戶在進行轉染操作時的經驗,一起來學習下吧~
Lipofectamine™ 2000 轉染試劑的保存與運輸:
由于Lipo2000是生物蛋白,存儲與運輸的溫度為4℃,所以就算是同一個批號的Lipo2000,只有在剛出廠分裝時活性才是相同的,但經過供應商的保存、運輸(運輸時溫控各不相同),其活性將有細微的變化。
Lipofectamine™ 2000 轉染試劑的優化:
每管Lipo2000的活性都具有差異,哪怕就算是同一管,使用的時間長了,后期的活性相較于初始使用時也不太一樣,所以在拿到一管新的Lipo2000時,一定要做一下活性優化;
如果一直使用Lipo2000做實驗,優化的步驟可以簡化:
假設之前轉化時每孔一直用4ul Lipo2000,那么優化的步驟可以簡化為只用5個孔,每個孔中Lipo2000用量分別為3ul,3.5ul,4ul, 4.5ul, 5ul其他條件不變,看哪個Lipo2000的用量結果最好,接下來的實驗就選用優化的用量。
Lipofectamine™ 2000 轉染試劑的使用要點:
1. 使用前將整管的Lipo2000混勻,分裝,最好分成100ul/管;
2. 實驗前,將分裝好的100ul Lipo2000和質粒DNA(或RNA)放到實驗臺上室溫平衡,不需要冰上保存;
3. 將Opti-MEM培養基放到水浴鍋中37°C平衡;
4. 按照說明書進行轉染,注意控制好每一步操作的時間;
5. Lipo2000的用量并不是越多越好,實際上,Lipo2000一旦加多,毒性會增加,細胞會死亡,轉化效率會大幅降低。
綜上所述,Lipofectamine™ 2000 作為高效、常用的轉染工具,其成功應用的關鍵在于充分認識其活性特性并實施精細的操作優化。深刻理解其活性會因儲存、運輸及使用過程而變化,是新批次試劑到手后必須進行活性優化的核心原因。 我們在實操時要遵循經驗要點——優化用量、規范分裝、注意平衡、控制時間、警惕毒性——將極大提升實驗的可重復性和成功率。希望以上內容能助您在基因表達、功能研究等實驗中更加得心應手,讓 Lipofectamine™ 2000 轉染試劑成為您探索細胞奧秘的堅實助力。科學始于嚴謹,成于細節,預祝您的轉染實驗順利高效!
產品名稱 | 貨號 | 規格 | 貨期 |
Lipofectamine™ 2000 轉染試劑 | 11668019 | 1.5ml | 現貨 |
柏萊源(天津)生物科技有限公司的優勢:
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