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【應(yīng)用】微量凱氏定氮法在乳制品中的應(yīng)用

來源:步琦實(shí)驗(yàn)室設(shè)備貿(mào)易(上海)有限公司   2025年07月22日 16:56  

微量凱氏定氮法

在乳制品中的應(yīng)用

凱氮應(yīng)用


1



簡(jiǎn)介

本文介紹了一種測(cè)定乳制品總蛋白質(zhì)含量的簡(jiǎn)便可靠的方法,按照“微氮”方法進(jìn)行樣品消化,顯著減少了化學(xué)試劑和消耗品的使用,從而帶來了生態(tài)和經(jīng)濟(jì)上的雙重優(yōu)勢(shì)。使用全自動(dòng)凱氏定氮儀 K-375 和進(jìn)樣器 K-376 / K-377 按照標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行蒸汽蒸餾,隨后進(jìn)行電位滴定法進(jìn)行滴定。


2



設(shè)備

  • 尾氣吸收儀 K-415(114152331)

  • 消解儀 K-449 (1154492000)

  • 凱氏定氮儀 K-375/K-377(113751720)

  • 樣品管 300 mL(037377)

  • 分析天平(精度±0.1 mg)


3



化學(xué)品與材料

化學(xué)品:

  • 濃度 98% 的硫酸,默克公司(1007482500)

  • 凱氏定氮片(11057980)

  • 32% NaOH

  • 2% 硼酸,pH 值調(diào)至 4.65

  • 硫酸 0.01mol/L

為確保安全操作,請(qǐng)注意所有相關(guān)的材料安全數(shù)據(jù)表(MSDS)!


標(biāo)準(zhǔn)樣品:

  • 蛋白質(zhì)含量標(biāo)為每 3.7g/100g 酸奶

  • 蛋白質(zhì)含量標(biāo)注為每 9.7g/100g 夸克奶酪

  • 標(biāo)簽上標(biāo)明蛋白質(zhì)含量為 32g/100g 帕爾馬干酪


4



實(shí)驗(yàn)流程

4.1  消化方法 - 樣品

  1. 按照 表1 中的說明,將每個(gè)樣本放入 300mL 的樣品管中。

  2. 加入 2 片催化片和 8mL 濃度為 96% 的硫酸。

  3. 準(zhǔn)備額外的空白和化學(xué)試劑,不包含樣品。

  4. 連接 K-415 與 K-449,以吸收消化過程中產(chǎn)生的酸性煙霧。


按照 表1 中所列參數(shù)啟動(dòng)消解程序。

加熱步驟

溫度 [攝氏度]

時(shí)間 [分鐘]

預(yù)熱

350

-

1

420

120

冷卻

-

30


4.2  蒸餾與滴定

按照 表2 中所列參數(shù)蒸餾樣品。


表2: K-375/K-376 蒸餾和滴定的參數(shù)


4.3  計(jì)算

結(jié)果以氮的百分比計(jì)算得出。為了計(jì)算樣品中的蛋白質(zhì)含量,需將氮含量乘以特定樣品的蛋白質(zhì)系數(shù)。以下公式(1)、(2)和(3)用于計(jì)算結(jié)果。


5



結(jié)果

5.1  色氨酸的回收率

表3 列出了色氨酸分析(含量>99%)的氮測(cè)定結(jié)果及回收率。色氨酸的理論氮含量為 13.72%。回收率在98% - 102% 的規(guī)定范圍內(nèi)。

色氨酸

mSample [g]

VSample [mL]

% NTry

回收率 [%]

示例 1

0.0283

14.220

13.53

98.65

示例 2

0.0302

15.289

13.67

99.67

平均值 [%]

-

-

13.60

99.16

相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(%)

-

-

0.73

0.73

空白體積的平均值 (VBlank) 為 0.3985 mL(n = 2)。


5.1  乳制品中蛋白質(zhì)的測(cè)定

乳制品中氮和蛋白質(zhì)含量的測(cè)定結(jié)果見 表4表6


表4:酸奶中氮和蛋白質(zhì)含量測(cè)定結(jié)果(標(biāo)示蛋白質(zhì)含量為 3.7g/100g)。

酸奶

mSample [g]

VSample [mL]

% N

百分比 P

示例 1

0.258

6.821

0.68

4.34

示例 2

0.2545

6.306

0.63

4.04

示例 2

0.2702

6.591

0.63

4.00

平均值 [%]

-

-

0.65

4.13

相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(%)

-

-

4.58

4.58

空白體積的平均值 (VBlank) 為 0.381 毫升(n = 2)。


表 5:夸克奶酪(標(biāo)示蛋白質(zhì)含量 9.7g/100g)中氮和蛋白質(zhì)的含量。

夸克奶酪

mSample [g]

VSample [mL]

% N

百分比 P

示例 1

0.1591

10.216

1.70

10.86

示例 2

0.179

10.94

1.63

10.37

示例 2

0.1444

9.019

1.64

10.48

平均值 [%]

-

-

1.66

10.57

相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(%)

-

-

2.40

2.40


表6: 帕爾馬干酪中氮和蛋白質(zhì)含量測(cè)定結(jié)果(標(biāo)示蛋白質(zhì)含量 32g/100g)

帕爾馬干酪

mSample [g]

VSample [mL]

% N

百分比 P

示例 1

0.1261

22.684

4.92

31.37

示例 2

0.1168

20.877

4.88

31.10

示例 2

0.1411

25.052

4.86

31.03

平均值 [%]

-

-

4.89

31.17

相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(%)

-

-

0.57

0.57


6



結(jié)論

使用消解儀 K-449 和全自動(dòng)凱氏定氮儀 K-375 / K-376 通過電位滴定法測(cè)定乳制品中的氮和蛋白質(zhì), 可獲得可靠且重現(xiàn)性好的結(jié)果,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差低(RSD)。微量凱氏定氮法減少了消解過程中硫酸和催化劑的用量,也減少了蒸餾步驟中 NaOH 的用量。化學(xué)試劑用量的節(jié)省為經(jīng)典凱氏定氮法帶來了經(jīng)濟(jì)和生態(tài)方面的雙重優(yōu)勢(shì),同時(shí)又保持了其高精度和高準(zhǔn)確度。

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