TOMY高壓滅菌器滅菌效果驗證標準操作流程（SOP）

高壓滅菌效果的驗證是確保滅菌器性能可靠、滅菌過程符合國際標準（如ISO 17665、USP <1229>、EN 285等）的核心環節。TOMY高壓滅菌器作為精密設備，其驗證需通過物理監測、化學監測和生物監測三重手段，結合規范的裝載方式與周期測試。以下是完整的標準操作流程：

一、驗證前準備

1. 設備狀態確認

• 檢查滅菌器運行記錄，確認近期無報警。

• 驗證腔體密封圈完整性、排水濾網清潔度及安全閥校驗有效期。

• 執行空載BD測試（Bowie-Dick Test），檢測蒸汽穿透性和空氣排除效果（每日運行前必需）。

2. 驗證工具準備

• 標準紡織包：25cm×25cm×30cm，純棉手術巾折疊，重量4.5kg±0.5kg。

• 管腔挑戰包：內置1.5m長聚四氟乙烯管（內徑2mm，外徑4mm）。

• 選用嗜熱脂肪地芽孢桿菌（Geobacillus stearothermophilus ATCC 7953），孢子濃度≥10? CFU/片。

• 一類：過程指示卡（貼于包裹外部）。

• 四類：多參數指示卡（貼于最難滅菌位置）。

• 五類：整合指示物（模擬生物指示劑響應）。

• 物理監測設備：溫度/壓力數據記錄儀（需經計量校準，精度±0.5℃）。

• 化學指示物：

• 生物指示劑（BI）：

• 測試包：

二、物理監測流程（實時參數驗證）

1. 溫度-壓力傳感器布點

• 腔體排水口（冷點）。

• 滅菌物品幾何中心。

• 蒸汽入口附近（熱點）。

• 將多通道數據記錄儀探頭置于：

• 探頭避免接觸金屬壁，確保蒸汽直接接觸。

2. 程序運行與數據采集

• 所有點位≥121℃的持續時間≥設定滅菌時間（如20min）。

• 溫度波動范圍≤±1℃（滅菌階段）。

• 壓力與溫度對應關系符合飽和蒸汽曲線（如121℃對應102.9kPa）。

• 選擇待驗證滅菌程序（如：121℃×20min，重力置換模式）。

• 啟動滅菌循環，記錄儀全程采集溫度/壓力數據，采樣頻率≥1次/10秒。

• 合格標準：

三、化學監測流程（過程指示驗證）

1. 指示物放置

• 將五類化學指示物放入測試包中心及最難滅菌位置（如器械關節、管腔內部）。

• 一類指示卡貼于每個滅菌包裹外側。

2. 結果判讀

• 五類指示物：必須達到標定閾值（如黑色移至“ACCEPT”窗口）。

• 一類指示卡：均勻變為指定顏色（如米白色→深褐色）。

• 滅菌結束后，立即檢查指示物顏色變化：

• 不合格處理：立即終止使用該批次物品，啟動偏差調查。

四、生物監測流程（滅菌效力金標準）

1. 生物指示劑布點

• 將BI孢子條置于測試包中心及冷點區域（每滅菌柜至少3點）。

• 同步設置陽性對照（未滅菌BI）與陰性對照（已滅菌BI）。

2. 培養與結果判定

• 立即停用滅菌器，召回同批次物品。

• 執行滅菌故障調查（程序參數、裝載方式、設備維護等）。

• 測試組BI：無顏色變化（紫色→黃色為陽性）。

• 陽性對照：必須顯色。

• 陰性對照：無變化。

• 常規：48小時（快速檢測型可縮至3小時）。

• 培養基：含溴甲酚紫的胰蛋白酶大豆肉湯（TSB）。

• 溫度：56-60℃恒溫培養。

• 培養條件：

• 培養周期：

• 合格標準：

• 失敗處理：

五、裝載方式驗證（最大挑戰測試）

1. 滿載測試設計

• 使用標準測試包+實際物品混合裝載，占據≥90%腔體容積。

• 模擬“最差情況”：金屬器械密集區、織物吸濕區、管腔器械垂直放置。

2. 冷點定位與復測

• 通過物理監測確定滿載冷點位置。

• 在冷點重復生物監測，確保FO值（致死率）≥60（即121℃等效滅菌時間≥60分鐘）。

六、驗證周期與記錄

1. 周期性驗證頻率：

• 物理監測：每周。

• 生物監測：每月（醫療機構需每日或每鍋）。

• 驗證：新設備安裝或大修后。

• 定期驗證：

• 變更控制：程序參數、裝載模式、物品類型變更時重新驗證。

2. 文檔管理：

• 記錄所有監測數據（溫度曲線、BI培養結果、化學指示物照片）。

• 生成驗證報告，包含：設備編號、程序參數、測試日期、結果分析、簽名審核。

七、驗證失敗處理流程

1. 立即停用滅菌器并張貼警示標識。

2. 檢查物理監測數據，排除溫度/壓力異常。

3. 復核化學指示物與BI培養結果。

4. 排查設備故障（蒸汽質量、傳感器校準、門密封性）。

5. 整改后執行3次連續空載+滿載生物監測，全部合格方可重新啟用。

八、注意事項

• 蒸汽質量要求：
  干燥度（≥97%）、非凝性氣體（≤3.5%），定期檢測蒸汽飽和度。

• 生物指示劑管理：
  避光冷藏（2-8℃），使用前平衡至室溫，記錄批號及有效期。

• 人員培訓：
  操作員需通過滅菌原理、監測方法及應急處理考核。

總結：TOMY高壓滅菌器的滅菌效果驗證是一個系統化工程，需整合物理、化學、生物三重監測手段，結合科學的裝載設計與嚴格的周期管理。只有通過全流程驗證，才能確保滅菌過程符合ISO 17665等法規要求，為實驗室生物安全與醫療質量提供保障。