一、物質名稱

• 英文名稱：DyLight 633 Maleimide Phalloidin

• 中文名稱：DyLight 633 馬來酰亞胺鬼筆環肽

二、基本概述

DyLight 633 馬來酰亞胺鬼筆環肽是一種熒光標記的鬼筆環肽衍生物，由天然鬼筆環肽與DyLight 633熒光染料通過馬來酰亞胺基團共價結合而成。其主要用于細胞骨架中肌動蛋白（F-actin）的特異性標記，在熒光顯微鏡成像中提供紅色至遠紅色熒光信號。

三、制備步驟

1. 原料準備

• 鬼筆環肽提取：從致命毒蕈（如鵝膏菌屬）中分離純化天然鬼筆環肽，通過色譜技術（如HPLC）獲得高純度單體。

• DyLight 633染料合成：基于磺化菁染料骨架，通過化學修飾引入馬來酰亞胺反應基團，合成DyLight 633馬來酰亞胺染料。

2. 鬼筆環肽活化

• 保護基團處理：若鬼筆環肽含游離巰基或其他活性基團，需通過乙酰化或琥珀酰化封閉非目標位點，確保馬來酰亞胺僅與特定殘基（如半胱氨酸）結合。

• 馬來酰亞胺修飾：將鬼筆環肽與馬來酰亞胺活化中間體（如N-羥基琥珀酰亞胺馬來酰亞胺酯）在堿性緩沖液（pH 7.4-8.0）中反應，形成馬來酰亞胺-鬼筆環肽中間體。

3. 熒光染料偶聯

• 共價結合：將DyLight 633馬來酰亞胺染料與馬來酰亞胺-鬼筆環肽中間體在室溫下避光孵育（通常4-12小時），通過硫醚鍵形成穩定共價連接。

• 純化分離：通過凝膠過濾色譜（如Sephadex G-25）或離子交換色譜去除未反應的染料和副產物，獲得純化的DyLight 633馬來酰亞胺鬼筆環肽。

4. 質量控制

• 純度檢測：采用HPLC或SDS-PAGE驗證產物純度，確保無游離染料或未標記鬼筆環肽殘留。

• 熒光特性驗證：通過紫外-可見光譜和熒光分光光度計確認DyLight 633的激發/發射波長（約633 nm/650 nm附近）。

四、特性與注意事項

• 特異性結合：鬼筆環肽部分通過靜電作用與F-actin緊密結合，DyLight 633提供穩定熒光信號，適用于固定細胞或組織的成像。

• 光穩定性：DyLight 633染料具有較高的光穩定性，適合長時間曝光成像。

• 儲存條件：需避光保存于-20℃干燥環境中，避免反復凍融。

五、應用背景

該標記物通過鬼筆環肽的高親和力與肌動蛋白結合，在細胞生物學研究中用于觀察細胞形態、遷移及應力纖維分布，輔助理解細胞骨架動態變化機制。其熒光特性適配多色標記實驗，可與綠色或藍色熒光探針聯合使用。

產地：西安瑞禧生物

用途：科研

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