手機版
化工儀器網手機版
化工儀器網小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
細胞凍存前需要做什么預處理嗎
01在細胞被消化和離心后，去除上清液并收集細胞沉淀，它們通常需要用冷凍保存液再次懸浮并轉移到冷凍保存管中。凍存液中一般含有滲透型的保護液如甘油或10%的二甲基亞砜(DMSO)和10%-90%胎牛血清。
02細胞內外的主要成分是水。如果細胞在沒有保護溶液的情況下直接冷凍，細胞內外的水會凝結成冰晶，對細胞造成內源性的機械損傷。細胞內的水凝結引起的細胞脫水也會引起細胞內pH值的變化、蛋白質變性、細胞內部器官功能的喪失，甚至細胞核內的DNA損傷，最終可能導致細胞死亡。
03而凍存液往往都是易溶解的小分子物質，具有細胞滲透性，可以穿過細胞膜，進入細胞內，降低冰點，同時又可以提高細胞膜對水的通透性，使得細胞內水分滲出到細胞外，從而減少細胞內冰晶的形成。
在準備冷凍靶細胞之前，必須確保細胞處于最佳生長狀態，這可以通過以下指標進行觀察：
1培養基的顏色和渾濁情況
培養基的顏色可以指示細胞是否過度生長(例如，如果細胞是黃色，則表示它們過度生長)；介質的渾濁度通常表明存在污染，不適合冷凍。
2細胞培養的時間
通常，建議將新恢復的細胞冷凍約兩周。如果細胞連續培養兩個月以上，性狀率會發生一些變化，此時的細胞不適合冷凍。
3細胞的數目
在凍存過程中，每只凍存管內細胞最佳濃度為5x10^6個/ml—1x10^7個/ml，高密度或低密度對細胞存活率有一定影響。當細胞數量不足時，不建議冷凍細胞。
免責聲明
- 凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。
采購中心