甲磺酸乙酯（EMS）細胞突變誘導試劑盒產品說明書（中文版）

主要用途甲磺酸乙酯（EMS）細胞突變誘導試劑盒產品說明書

甲磺酸乙酯（EMS）細胞突變誘導試劑是一種旨在使用烷化劑甲磺酸乙酯誘導細胞發生變異而產生HPRT或TK基因功能缺失的突變株，成為篩選應用標記細胞的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于動物細胞和人體細胞。產品嚴格無菌，即到即用，性能穩定，突變頻率高。

技術背景

甲磺酸乙酯（ethyl methanesulfonate，EMS）是一種化學誘變致畸的烷化劑（alkylating agent）。它將導致細胞次-鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶（hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase；HPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（thymidine kinase，TK）基因座發生位點突變，而引起基因功能缺失。由此采用6-硫氫基鳥糞嘌呤（6-thioguanine；6-TG）和5-溴脫氧尿嘧啶（5-Bromodeoxyuridine；BudR）分別篩選TK和HPRT缺失型細胞，因為6-TG是PURINES的結構替代物，而BUdR是THYMIDINE的結構類似物，當TK和HPRT正常的情況下，它們將利用6-TG和BUdR進行DNA復制而使細胞死亡，反之，它們無法利用，細胞則繼續生存。這是負向選擇。但是HPRT正常的細胞（例如正常人體細胞，其X染色體的長臂上帶有此基因）能在氨基嘌呤胸苷（hypoxanthine/aminopterin/thymidine；HAT）培養基中生長，這是正向選擇。

產品內容

 甲磺酸乙酯（EMS）細胞突變誘導試劑盒產品說明書

 EMS 溶液A（Reagent A）         5毫升

 EMS 溶液B（Reagent B）     5毫升

 EMS 溶液C（Reagent C）     5毫升

 EMS 溶液D（Reagent D）     5毫升

 EMS 溶液E（Reagent E）     5毫升

清理液（Reagent F）      2 X 500毫升

染色液（Reagent G）        200毫升

 TK篩選液（Reagent H）    12毫升

產品說明書              1份

保存方式

 甲磺酸乙酯（EMS）細胞突變誘導試劑盒產品說明書

 TK篩選液（Reagent H）保存在－20℃冰箱里；清理液（Reagent F）和 EMS溶液保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent G）保存在室溫下； EMS溶液具有毒性，注意操作安全。有效保證6月

用戶自備

 甲磺酸乙酯（EMS）細胞突變誘導試劑盒產品說明書

25cm²細胞培養瓶：用于培養細胞的容器

75cm²細胞培養瓶：用于培養細胞的容器

 DMEM*細胞培養基（12052）：用于細胞培養的營養基

胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（12024）：用于細胞脫離

血細胞計數器：用于細胞計量