就在前不久，我公司楊收到一位客戶對實驗的咨詢留言。這位客戶說道：“初次做間接ELISA，做了幾次結果都沒有顯色，原因在哪里呢”

    收到留言后，楊為客戶安排技術去。針對問題描述，上海滬鼎技術人員分析出為何間接ELISA沒有顯色，可能原因有這幾個方面：

    1.包被原：包括您的包被液有無問題，有沒有配錯。包被原一般加100微升，37度2小時；

    2.封閉：封閉液用的是否適合？您說做了幾次都沒顯色，空白孔也不顯嗎？如果空白也無顏色，那封閉就沒有問題。一般封閉是200微升每孔，也可以滿孔封閉

    3.一抗：檢查您的一抗是否失效。是否是在37度反應

    4.二抗：底物，底物緩沖液……這些都要好好檢查！

    5.洗滌：用PBST洗滌，包被和封閉時洗板3次；一抗二抗洗滌5次，每次間隔3分鐘。

    手工和機器洗滌沒什么不同，就是省力一些。洗5次不會有負影響，在一抗和二抗洗滌過程中，恰恰需要多洗幾次，這樣有助于減少非特異性吸附。

希望以上文獻匯總能給您的ELISA實驗帶來幫助，歡迎科研朋友咨詢、提出意見，愿我們的努力成果與您的科研碰撞出不一樣的火花！

  上海滬鼎生物科技有限公司主營：Elisa試劑盒,人Elisa試劑盒,大鼠Elisa試劑盒,小鼠Elisa試劑盒,生物試劑,血清,抗體,培養基,標準品,國產血清、GIBCO胎牛血清等。種屬齊全，*。期待您的與合作！