一、系統定義與生物學起源

CRISPR/Cas12a（原稱 Cpf1）屬于 Class 2 Type V 型 CRISPR 系統，是細菌與古菌的適應性免疫機制，用于識別并切割入侵的病毒或質粒 DNA。與 Cas9 相比，其du特的工作模式使其在基因編輯、分子檢測及多基因調控中展現顯著優勢。

二、核心分子機制與技術特性

（一）作用流程

（二）關鍵特性對比（Cas12a vs Cas9）

注：

• V 表示 A/C/G（非 T），如 5'-TTTA/TTTC/TTTG-3'。

• 黏性末端 更易觸發同源重組修復（HDR），提升精準編輯效率。

三、優勢與應用場景

（一）技術優勢

1. 多基因編輯高效性：

• 單一 crRNA 陣列可同時靶向多個基因，無需重復構建 tracrRNA，適用于復雜通路調控。

2. AT 富集基因組適配性：

• 對富含 AT 的基因組（如植物、寄生蟲）編輯效率顯著高于 Cas9。

3. 低脫靶風險：

• 嚴格依賴 PAM 激活，且反式切割活性可關閉，全基因組脫靶率低于 Cas9。

4. 遞送便捷性：

• 蛋白更小，更易包裝進 AAV 等病毒載體，適合體內基因治療。

（二）核心應用領域