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1. 精密稱取羅紅霉素粉0.0100g;

2. 于100ml容量瓶中，加入5ml乙醇充分溶解；

3. 加稀鹽酸至刻度，精密量取溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml；

4. 分別置25ml帶塞比色管中；

5. 不足5ml的加入鹽酸補足，加入硫酸5.0ml，搖勻，放置30min；

6. 搖勻，于486nm波長處分別測定吸光度，以吸收度對質量濃度進行回歸，求得回歸方程。

結果表明羅紅霉素在8~54微克每毫升濃度范圍內與吸光度線性關系良好。按上述方法可得羅紅霉素在Ph6.8的磷酸緩沖液標準曲線，并且在25~128微克每毫升的濃度范圍內與吸光度線性關系良好。