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產(chǎn)品簡介：

核酸雜交是指用一種標記的核酸探針與印跡膜上的核酸進行雜交，由此檢測印跡膜上是否存在與探針同源的核酸分子。當探針是 Oligo 分子時，需要使用專門的核酸雜交液，本產(chǎn)品就是為此開發(fā)的 Oligo 探針專用雜交液。

產(chǎn)品特點：

1.即開即用，使用方便。

2.既可以用于 DNA Oligo 探針雜交，也可以用于 RNA Oligo 探針雜交。

3.本產(chǎn)品足夠 5 平方厘米印跡膜的 10 次核酸雜交。

4.高效核酸雜交液（Oligo 探針專用）只可用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

成分規(guī)格包裝

高效核酸雜液（Oligo 探針專用）10 mL10 mL 本色瓶

使用手冊1 份無

運輸及保存

低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

自備試劑

印跡膜，Oligo 探針，6×SSC，2×SSC，0.1×SSC

使用方法：

一、雜交溫度的確定

1.Oligo 探針的最佳雜交溫度一般比Tm 低5℃。計算Tm 的公式是Tm=GC數(shù)量×4℃+AT 數(shù)量×2℃。但由于 Oligo 較短，更容易受各種因素影響

（如錯配率、修飾堿基比例等），所以最佳溫度可能還需要適度摸索和優(yōu)化。Oligo 探針可以在室溫洗膜。

二、預(yù)雜交

2.將轉(zhuǎn)膜所得的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6×SSC 溶液中，使其充分濕潤。

3.將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中（塑料袋最好預(yù)先封口，再剪掉一  角，留一個小口），按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 本產(chǎn)品的比例沿小口加入本產(chǎn)品，然后用塑料封口機將口封牢。

4.將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在最佳雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中，  保溫 1-2 小時，延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停的搖動狀態(tài)中，使本產(chǎn)品與印跡膜充分接觸。

三、雜交

5.將 Oligo 探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中（先用剪刀剪一小口，加入 Oligo 探針后用熱封機封口）。Oligo 探針的加入量視探針標記效率而定，一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷貝基因，Oligo 探針的加入量應(yīng)加大，而對于檢測克隆的基因片段，則 Oligo探針的量可減少。如果是放射性 Oligo 探針，應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中，以避免雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。

6.在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫，時間一般為 6-12 小時。四、洗膜

7.雜交完畢，取出塑料袋，剪去一角，倒出所有的含 Oligo 探針的雜交液。

此含 Oligo 探針的雜交液可以多次使用。

8.剪開雜交袋，用鑷子取出印跡膜，浸沒于大量的 2×SSC（含 0.5 % SDS）溶液中，室溫下振蕩漂洗 15 分鐘。洗膜時一定不要使印跡膜干燥。

9.重復(fù)上步操作一次。

10.將印跡膜轉(zhuǎn)移至 0.1×SSC（含 0.1% SDS）溶液中，在計算好的洗膜溫度下振蕩漂洗 30 分鐘至 1 小時。

11.重復(fù)上步操作一次。

12.將印跡膜轉(zhuǎn)移到濾紙上，吸去表面液體后印跡膜即可用于后續(xù)檢測。

選擇我們的高效核酸雜交液（Oligo 探針專用），就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！