目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>試劑盒>> 實(shí)時(shí)全基因組擴(kuò)增試劑盒(MDA 熒光染料法)
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更新時(shí)間:2025-07-18 19:33:27瀏覽次數(shù):141評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 25T |
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貨號(hào) | XY-D-1707 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | / |
保存條件 | 常溫 | 有效期 | 12個(gè)月 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本產(chǎn)品是用于MDA(Multiplex Displacement Amplification)技術(shù)的全基因組DNA擴(kuò)增試劑盒,它利用隨機(jī)引物結(jié)合在全基因組(變性后)的不同位 置,然后利用具有超長(zhǎng)DNA合成能力的phi29 DNA聚合酶,進(jìn)行鏈取代合成。MDA擴(kuò)增DNA的示意圖如下:
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超-強(qiáng)鏈取代能力,故所得擴(kuò)增DNA突變率比PCR低至少10倍。
2.可以將基因組DNA擴(kuò)增上萬倍,非常適用于痕量珍貴樣品。
3.可使用各種來源的樣品,尤其是痕量法醫(yī)樣品,包括全血,干血,發(fā)根,口腔粘膜刮液培養(yǎng)細(xì)胞,真菌和病毒等。
4.操作簡(jiǎn)便快捷,恒溫(30℃)反應(yīng),無須貴重PCR儀即可實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增。
5.含有熒光染料,故可以實(shí)時(shí)檢測(cè)擴(kuò)增效果,不需要反應(yīng)結(jié)束后電泳檢測(cè),避免浪費(fèi)寶貴的擴(kuò)增產(chǎn)物。
6.產(chǎn)物可用于多種后續(xù)試驗(yàn),包括多重PCR、長(zhǎng)片斷PCR、定量PCR、克隆、文庫構(gòu)建、單倍型分析、測(cè)序、基因芯片分析、各種遺傳分析(片段差異, 微衛(wèi)星差異,SNP,STR)等。
7.本產(chǎn)品足夠30次20 ?L體系的全基因組擴(kuò)增。
8.實(shí)時(shí)全基因組擴(kuò)增試劑盒(MDA 熒光染料法)只能用于科研,且只適用于擴(kuò)增純化好的基因組DNA。
產(chǎn)品參數(shù):
成分 規(guī)格包裝
溶液A 30 μL0.5 mL 藍(lán)色蓋
MDA 專用隨機(jī)引物溶液 60 μL0.5 mL 棕色管
20×飽和染料30 μL0.5 mL 棕色管
10×DNA 環(huán)化-擴(kuò)增緩沖液 60 μL0.5 mL 綠色蓋
dNTP(25 mM) 30 μL0.5 mL 白色蓋
DNA 環(huán)化酶A 15 μL0.5 mL 紫色蓋
DNA 環(huán)化酶B 15 μL0.5 mL 紫色蓋
Phi 29 DNA 聚合酶
(10 U/μL) 15 μL0.5 mL 紅色蓋
使用手冊(cè) 1 份無
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。
自備試劑
純化好的基因組 DNA
使用方法:
1如果有 N 個(gè) DNA 模板,則標(biāo)記 2N 個(gè)PCR 管,多出的一組為不加模板的陰性對(duì)照管。
2設(shè)置 20 μL 的擴(kuò)增反應(yīng)
330℃保溫 12 小時(shí)。最好使用PCR 儀進(jìn)行 30℃保溫(注意:不是 37℃)并打開熱蓋保溫。每 10 分鐘設(shè)置成一個(gè)循環(huán),采集一次 SYBR 通道的熒光信號(hào)。由于是可以實(shí)時(shí)檢測(cè)反應(yīng),所以反應(yīng)不一定要在設(shè)置時(shí)間到達(dá)后結(jié)束,可以在擴(kuò)增曲線進(jìn)入平臺(tái)期后(已經(jīng)沒有新的 DNA 合成)結(jié)束。
465℃保溫 10 分鐘使phi29 DNA 聚合酶滅活。注:由于 phi29 DNA 聚合酶有 DNA 外切活性,所以最好將其滅活以免干擾后續(xù)反應(yīng)。
5典型實(shí)驗(yàn)結(jié)果。有擴(kuò)增的樣本將有平緩的 S 熒光曲線,無模板對(duì)照將沒有此標(biāo)準(zhǔn)擴(kuò)增曲線或擴(kuò)增曲線。
6若采用 30℃金屬浴或水浴,必須在樣品管中加入 50 μL 石蠟油以防水分蒸發(fā),使用電泳檢測(cè)或 PCR 檢測(cè)是否有擴(kuò)增。
7擴(kuò)增所得 DNA 可以用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
選擇我們的實(shí)時(shí)全基因組擴(kuò)增試劑盒(MDA 熒光染料法),就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案,為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航!
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