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產(chǎn)品簡介：

本試劑盒是基于T7 RNA 聚合酶的 RNA 體外轉(zhuǎn)錄及加帽試劑盒，它利用含有 T7 啟動子的模版 DNA，以 NTP 和m7G(5' )ppp(5' )G 為底物，從 T7 啟動子下游開始合成與模版 DNA 中一條鏈互補的 RNA，簡單快速獲得大量的 RNA 分子，其中部分 5 端含有帽結(jié)構(gòu)。

產(chǎn)品特點：

1.即開即用，用戶只需提供含 T7 啟動子的 DNA 模板即可以進行體外轉(zhuǎn)錄實驗， 不需要單獨準備每一個成份。

2.體外轉(zhuǎn)錄和加帽同管一步式進行，不需要先體外轉(zhuǎn)錄再加帽。

3.單溶液預(yù)配液，減少加樣次數(shù)，避免了操作誤差，增加了可重復(fù)性。

4.模版 DNA 可以是線性化的質(zhì)粒 DNA，也可以是 PCR 擴增產(chǎn)物。

5.可以合成的 RNA 的最佳長度在 20 nt 到 2000 nt 之間。

6.產(chǎn)品配方經(jīng)過精心優(yōu)化，每μg DNA 模版可以合成 2-6 μg RNA。

7.得到的加帽 RNA 比不加帽的 RNA 更穩(wěn)定，可以用于 RNA 結(jié)構(gòu)研究、核酶生物化學(xué)、體外翻譯、RNA-蛋白質(zhì)相互作用、反義技術(shù)、SELEX 技術(shù)和 RNA 干擾（RNAi）等實驗。

8.本試劑盒足夠 5 次 20 μL 體系的體外轉(zhuǎn)錄實驗，并且只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

成份規(guī)格包裝

2×T7 體外轉(zhuǎn)錄及加帽預(yù)配液50 μL0.5 mL 本色蓋

T7 RNA 聚合酶-RI 混合液5 μL0.5 mL 黃蓋管

RNase-free 水100 μL1.5 mL 藍蓋管

使用手冊1 份無

保存和運輸

T7 體外轉(zhuǎn)錄及加帽試劑盒低溫運輸，-20℃保存、有效期一年。

自備試劑

Tris 飽和酚、氯仿、RNase-free 75%乙醇(均可從本公司另購)

疑難解答：

1、沒有 RNA 產(chǎn)物。最常見原因是模板有 RNase 污染，可用純化好的 RNA 跟模板 DNA 一起保溫再電泳，再檢測其是否有污染。

2、RNA 產(chǎn)量低。最常見的原因是 DNA 模板。在轉(zhuǎn)錄序列的第一個和第二個堿基最好都是 G，在前 14 個堿基內(nèi)避免有 U 存在。

3、RNA 長度比預(yù)期的短。可能是模板序列中有T7 RNA 聚合酶的終止序列。可以改用 SP6 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒（啟動子也必須改成 SP6 啟動子）。

4、RNA 長度比預(yù)計的長。T7 RNA 聚合酶跟Taq DNA 聚合酶一樣，有不依賴于模板的加尾功能，最多有一半的 RNA 可以帶一個或兩個堿基的尾巴。如果RNA 長度比預(yù)計的長很多，模板又是質(zhì)粒 DNA，則可能是質(zhì)粒線性化不徹-底。

5、5’單磷酸還是三磷酸。如果使用 GTP，則得到的 RNA 是三磷酸，體外轉(zhuǎn)錄時如果保溫時間太長（如 12 小時），則有 50%的三磷酸會變成單磷酸。如果在轉(zhuǎn)錄體系中加入 GMP，則 T7 RNA 聚合酶將優(yōu)先使用 GMP，所得 RNA

產(chǎn)物中 5’端是單磷酸的比例將大大增加。

選擇我們的T7 體外轉(zhuǎn)錄及加帽試劑盒，就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！