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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1×10^6 |
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貨號 | BH1383 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,制藥/生物制藥 |
產品貨號:BH1383
產品規格:1×10^6
本產品僅供科學研究或進一步生產使用,不可用于臨床診斷或治療。
AsPC-1+LUC 人轉移胰腺腺癌細胞
細胞鑒定: STR 鑒定已通過
細胞來源 :國家資源庫
細胞背景: Chen 等人于 1982 年用一名患有胰腺癌的 62 歲女性白種人患者腹水中的細胞移植到裸鼠后建
立。可以表達 CEA,人胰腺相關抗原、人胰腺特異性抗原和黏蛋白。
細胞特性 形態:上皮細胞樣,貼壁生長
用途:僅供科研使用。
培養條件 1) 準備 RPMI-1640培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37 攝氏度,培養箱濕度為 70%-80%。注意事項 該細胞為穩定轉染 Luc 的細胞,隨細胞傳代次數的增加,其 Luc 熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。
建議收到細胞后至少傳 3 代,凍存留種后再進行篩選。
初次進行細胞篩選時,建議加入終濃度為 1ug/ml 嘌呤霉素的專用培養基維持培養,若無細胞漂 浮或者漂浮較少,即可更換為含 2ug/ml 嘌呤霉素的專用培養基繼續篩選,以此類推,至最高藥 物濃度為 5ug/ml。若篩選過程中,漂浮細胞大于 60%,則停止篩選,換成正常培養基培養,至細胞密度約 80%,可繼續加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當加入 5ug/ml 嘌呤霉素時細胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥專用培養基正常培養。
常溫發貨:收到后 T25 瓶消毒再放置培養箱靜置 2-3 小時后觀察密度和狀態拍照 2-3 張反饋給銷
售,密度達標就可以傳代。前期傳代比例 1:2,等再次長滿后傳代時建議凍存其中一整瓶成 1 個 1ml 凍存管,另外一瓶繼續傳代,反復凍存 2-3 只后才擴增做實驗,以防突發情況引起斷種。
干冰發貨:常規細胞發貨凍存管 2 只,復蘇 1 只,另外一只備用,第一個復蘇不成功時嚴格按照 廠家要求復蘇第二個,均沒有復蘇成功的情況即時留存復蘇照片通知銷售。
貼壁細胞參考:1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加入 0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA 于培養瓶中(T25 瓶 1-2mL,T75 瓶 2-3mL),置 于 37℃培養箱中消化 1-2 分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入 3-4ml 含 10%FBS的培養基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 3-5min,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
將細胞懸液按 1:2 的比例分到新 T25 瓶/6cm 培養皿中,添加 6-8ml 按照說明書要求配置的新的 專用培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按 1:2~1:5 的比例進行。
3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前 3 代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。
4)運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配
制的專用培養基來培養細胞。
懸浮細胞參考:
懸浮狀態下生長的細胞,可以通過向培養瓶中添加專用培養基來維持細胞的生長狀態,一般情況 下細胞密度維持在 1×105~1×106 個/mL(不同細胞對密度要求不同,)可以維持細胞的正常生長。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中 1000rpm,離心 5min,棄去上清,補加 1-2mL 培養液 后重懸混勻后將細胞懸液按 1:2 的比例分到新 T25 瓶中,添加 6-8ml 按照說明書要求配置的新的專用培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按 1:2~1:4 的比例進行。
運輸形式 低溫:(1)1mL 凍存管包裝干冰運輸,收到后-80 度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發 現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
常溫: (2) T25 瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
生物安全 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護, 所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮 中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋 子,從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。
AsPC-1+LUC 人轉移胰腺腺癌細胞