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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100T/96S |
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貨號 | BO6039 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 |
主要用途 | 可以反映土壤體系內活性微生物量以及其對有機物的降解活性 |
土壤脫氫酶(Soil dehydrogenase, sDHA)試劑盒說明書
微量法 100T/96S
土壤脫氫酶試劑盒
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:
土壤脫氫酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤體系內活性微生物量以及其對有機物的降解活性,可以作為土壤微生物的降解性能指標。
測定原理:
氫受體 2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride,TTC)在細胞呼吸過程中接受氫以后,被還原為三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),在波長 485nm 處有最大吸收峰,采用分光光度法于 485nm 測定其吸光值,即得土壤脫氫酶活性。
試劑的組成和配制:
產品名稱 | BO6039-100T/96S | Storage |
試劑一:粉劑 | 1 瓶 | 4℃避光 |
試劑二:粉劑 | 20ml | 4℃ |
試劑三:甲醇 | (自備) | |
說明書 | 一份 |
試劑一:粉劑×1 瓶,使用前加 10ml 試劑二溶解,4℃避光保存(盡量現配現用)。
自備儀器和用品:
篩子、天平、恒溫培養箱或水浴鍋、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、蒸餾水、甲醇(不允許快遞,請用戶自備)。
樣品處理:
新鮮土樣自然風干或 37 度烘箱風干,過 30~50 目篩。
測定步驟和操作表:
空白管 | 測定管 | |
樣品(g) | 0.05 | |
試劑一(μl) | 100 | |
試劑二(μl) | 100 | |
充分混勻,37℃培養 24h |
試劑三(μl) | 900 | 900 | ||
振蕩 1h,8000g,25℃,離心 5min,取 200μl 上清于微量石英比色皿/96 孔板,測定 A485, △A=A 測定-A 空白管。空白管只要做一管。 |
脫氫酶活力計算:
標準曲線:y = 0.0211x - 0.0312;R2 = 0.9988;x 為標準品濃度(μg/ml),y 為吸光值。 酶活單位定義:在 37℃時,每克土壤樣品每天催化產生 1μgTF 為一個酶活性單位。 sDHA(μg/ d /g 土樣)=(△A+0.0312)÷ 0.0211×V 反總÷W÷T= 47.39×(△A+0.0312)÷W V 反總:反應總體積,1ml;T:培養時間,1d;W:樣品質量,g
注意事項:
配制好的試劑一避光保存于 4℃,最好在一周內使用,若出現紅色,則不能使用。
土壤脫氫酶試劑盒
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