NobleRyder G9270 抗酒石酸酸性磷酸酶染色試劑盒 Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit

產品貨號：G9270

產品名稱：抗酒石酸酸性磷酸酶染色試劑盒，Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit

產品規格：4*10ml/4*20ml

抗酒石酸酸性磷酸酶染色試劑盒 酶類染色

產品簡介：

中文名稱：抗酒石酸酸性磷酸酶染色試劑盒

英文名稱：Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit

規格：4*10ml ; 4*20ml

儲存條件：-20℃，避光保存，有效期3個月。

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

NobleRyder G9270 抗酒石酸酸性磷酸酶染色試劑盒，Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit產品介紹

酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)分布極廣泛，遍布各種組織，主要存在于細胞的溶酶體內，所以常作為溶酶體標志酶。溶酶體外的酸性磷酸酶存在于內質網和胞質內。各種動物中的酸性磷酸酶各有不同，酸性磷酸酶的適宜pH為4.5-5.5。存在于正常人肺泡巨噬細胞和白血病人脾臟的抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resist n t acid phosphatase，TRAP)均在細胞濾泡中，并不是釋放入血液。血液中的TRAP絕大多數來源于破骨細胞，因此可以通過測量血液中的TRAP了解破骨細胞的功能狀態。

抗酒石酸酸性磷酸酶染色液以萘酚AS-BI為底物，在酸性pH下被酸性磷酸酶水解釋放出磷酸和萘酚，萘酚與重氮鹽偶聯生成有色產物，定位于細胞質中，若細胞內的ACP有抗酒石酸的活性，則呈陽性反應。該染色液可用于新鮮血涂片、細胞涂片，亦可用于冰凍切片、石蠟切片。

自備材料：

蒸餾水、恒溫箱、載玻片、光學顯微鏡

操作步驟：(僅供參考)

(一) 樣本處理：

1、細胞涂片：取新鮮全血或骨髓制備涂片，推玻片于載玻片保持30度，置于血液或細胞滴液的正前方， 稍往后移與血液或細胞滴液接觸使后者沿推片下緣散開，再勻速沿載玻片平面平穩向前滑動至均勻鋪 開為止，自然晾干。

2、貼壁培養細胞、細胞爬片：吸去培養基，1×PBS清洗3-4次，瀝去多余水分。取出細胞爬片。

3、冰凍切片：從冰箱取出放置恢復室溫，浸入蒸餾水清洗1-2min，瀝去多余水分。

4、石蠟切片：石蠟切片脫蠟5-10min，重復一次。無水乙醇5min，90%乙醇和70%乙醇各2min，蒸餾 水浸洗2min，瀝去多余水分。

(二) 染色孵育：

1、使用2-8℃預冷的TRAP固定液固定30s-3min，多數情況下30-60s即可。

2、蒸餾水洗，瀝去多余水分(不宜過分干燥)。

3、（切片處理）滴加TRAP孵育液覆蓋切片，置于濕盒內37℃溫箱孵育45-60min，蒸餾水洗。

4、（貼壁細胞）滴加 TRAP孵育液覆蓋細胞，置于37℃溫箱孵育45-60min，蒸餾水洗。

5、復染：蘇mu素或甲基綠復染液染色2-3min。如選用蘇mu素染色液復染，染色后須自來水返藍10min 或1×PBS返藍3-5min。

(三) 封片觀察：

1、（切片處理）蒸餾水稍洗，瀝去多余水分，滴加水性封片劑封片后鏡檢觀察。

2、（貼壁細胞）蒸餾水稍洗，可帶水或1×PBS鏡下觀察。

注意事項：

1、該染色試劑盒為酶活原位染色試劑盒，常用于破骨細胞細胞誘導培養后細胞鑒定和組織中特定細胞定位，反應底物和染料易失效，收到產品后建議第一時間根據說明書描述溫度妥善保存。

2、試劑B2為偶氮染料儲備液，有顆粒狀懸浮物屬正常現象不影響染色。如擔心，預混合B1和B2可使 顆粒物wan全溶解，但需在2小時內使用完畢。

3、酶活易受多種因素影響導致衰減或消失。建議樣本新鮮取材，使用預冷固定液在2-8℃冰箱固定，時間不宜超過24h。包埋時推薦使用低熔點蠟（52-56℃），避免熱失活。

4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

抗酒石酸酸性磷酸酶染色試劑盒 酶類染色 

產品訂購信息：

NobleRyder G9270 抗酒石酸酸性磷酸酶染色試劑盒，Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit 4*10ml/4*20ml