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詳細(xì)介紹
根據(jù)偽狂犬病病毒gE基因的序列,設(shè)計(jì)和合成了一對(duì)特異的可用于檢測(cè)偽狂犬病病毒野毒的PCR引物和一條Taqman熒光探針,采用Li ght Cycl e 480熒光定量PCR儀,建立了一種可實(shí)時(shí)定量檢測(cè)偽狂犬病病毒野毒的熒光定量PCR技術(shù)。該方法的線性范圍為1.0×102～1.0×1010拷貝,靈敏度可達(dá)4拷貝。檢測(cè)速度快,儀器的運(yùn)行時(shí)間僅為1 h。對(duì)13株豬偽狂犬病病毒野毒進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果均為陽(yáng)性;與偽狂犬病gE基因缺失疫苗、豬細(xì)小病毒和鴨瘟病毒無(wú)非特異性反應(yīng)。與病毒分離培養(yǎng)比較,該方法具有快速、靈敏、特異、定量、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),可用于科研上偽狂犬病病毒野毒與疫苗毒的區(qū)分,偽狂犬病病毒野毒的檢測(cè)和病毒分布的研究等。