性做久久久久久坡多野结衣-性做久久久久久久久浪潮-性欲影院-性影院-国产精品线路一线路二-国产精品兄妹在线观看麻豆

| 注冊| 產品展廳| 收藏該商鋪

行業產品

當前位置:
杭州實了個驗生物科技有限公司>>技術文章>>賽默飛熒光定量PCR儀注意事項

產品分類品牌分類

更多分類

賽默飛熒光定量PCR儀注意事項

閱讀:587        發布時間:2025-3-18

賽默飛熒光定量PCR儀(如QuantStudio系列)**時應注意的關鍵事項,涵蓋設備使用、實驗準備、數據分析、安全等方面:


一、實驗準備階段

  1. 樣本與試劑準備

    • 樣本應避免反復凍融,保持RNA/DNA質量。

    • 所有試劑應解凍并混勻后再使用。

    • 使用低吸附管或PCR專用耗材,減少吸附損失。

  2. 反應體系設置

    • 嚴格按照試劑說明書配制體系,注意引物、探針濃度。

    • 使用去RNA酶/去DNA酶的無核酸水配制。

    • 配置時操作應在冰上進行,避免酶活性變化。

  3. 加樣操作

    • 避免氣泡,影響熒光讀數。

    • 封板前輕輕離心,確保液體在孔底。

    • 使用光學封板膜,確保貼合緊密、無褶皺。


二、儀器操作階段

  1. PCR板放置

    • 保持板底清潔,避免灰塵、水漬影響檢測。

    • 板放入儀器前注意方向正確,與軟件板圖一致。

  2. 通道設定

    • 選擇與試劑染料匹配的熒光通道。

    • 若為多重檢測,確保熒光染料無通道重疊。

  3. 擴增程序設置

    • 根據反應體系設定溫度和循環參數。

    • 通常熒光采集設在延伸階段。

  4. 熔解曲線(如SYBR Green)

    • 啟用熔解曲線分析可判斷擴增特異性。

    • 單一峰形代表反應特異性良好。


三、數據分析階段

  1. Ct值判斷

    • Ct值過高(>35)應考慮模板濃度、污染或反應效率問題。

    • 無模板對照應無擴增曲線,否則懷疑污染。

  2. 擴增曲線觀察

    • 正常擴增曲線呈“S"型。

    • 曲線不規則或漂移可能因加樣誤差或設備問題。

  3. 標準曲線分析(絕對定量)

    • R2值應接近1,擴增效率在90–110%之間較理想。


四、安全與維護

  1. 設備清潔

    • 加熱模塊表面需定期擦拭。

    • 避免液體流入樣本槽,若有泄漏立即處理。

  2. 避免交叉污染

    • 區分模板制備區與擴增區。

    • 使用過濾吸頭,勤更換手套。

  3. 試劑儲存

    • 酶類試劑儲存于-20℃,避免頻繁凍融。

    • 染料類避光保存,使用后立即蓋緊。

  4. 數據備份

    • 定期導出實驗數據,避免軟件崩潰造成丟失。

    • 軟件升級前應先備份方法與結果文件。


收藏該商鋪

登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
二維碼 意見反饋
在線留言
主站蜘蛛池模板: 哈巴河县| 内丘县| 保定市| 大安市| 视频| 馆陶县| 确山县| 延津县| 古蔺县| 鹤壁市| 眉山市| 普宁市| 乐至县| 新野县| 大兴区| 沙雅县| 瑞昌市| 陆河县| 潮州市| 乐都县| 建瓯市| 蒙山县| 雷州市| 莒南县| 舒城县| 沛县| 灵武市| 庆云县| 丹巴县| 博客| 平度市| 霍城县| 东安县| 西安市| 武强县| 乌审旗| 托克逊县| 思茅市| 莱芜市| 双流县| 松江区|