Roche 11175025910 DIG RNA標記試劑盒(SP6/T7)
羅氏Roche總部位于瑞士巴塞爾,是全球在醫藥和診斷領域,致力于研究并處于領xian地位之一的保健集團。羅氏的診斷部門提供了獨yi無er的產品品種,為全shi界的研究人員、醫師、病人、醫院和實驗室提供多樣化的創新測試產品及服務。羅氏診斷在全球有近19,000人員正致力于科研、發展、產品的市場運作和服務以及一體化的解決方案。
Roche 11175025910 DIG RNA Labeling Kit (SP6/T7),產品簡介:
產品品牌:Roche
產品貨號:11175025910
產品名稱:DIG RNA Labeling Kit (SP6/T7)
產品規格:20 reactions
產品說明:
說明
一般描述
檢測時間:145分鐘
樣品材料
線性化質粒DNA
PCR產物
原理
DIG RNA標記試劑盒可產生已知長度的DIG標記單鏈RNA 探針。SP6或T7 RNA聚合酶都可在體外對來自模板DNA(在地gao辛-UTP存在情況下)對這些探針進行轉錄。
RNA標記通過體外轉錄完成
待轉錄的DNA被克隆至含有SP6及T7 RNA聚合酶的合適轉錄載體的多接頭位點(如pSPT 18或19)。相鄰的模板DNA在合適的位點進行線性化而RNA聚合酶用于生成“流失的"轉錄本。DIG-UTP被插入至轉錄本中。新合成RNA的每個第20至25個核苷酸都是DIG-UTP。由于核苷酸的濃度在標準轉錄反應中并不會成為限制,該反應可生成大量的標記RNA。
我們致力于為您提供更環保的替代產品,以符合“綠色化學的12項原則"的一項或多項原則要求。該產品為一種安全的化學品。 DIG系統是靈敏且具有成本效益的方案,可替代放射性標記和放射法檢測核酸。有許多已發表論文證明了DIG系統的通用性,因此,使用放射性標記不再是標記用于雜交的DNA的唯yi選擇。
試劑盒用于通過SP6和T7聚合酶進行的體外轉錄而實現基于地gao辛-UTP的RNA標記。通過這種方法,已知長度的單鏈RNA探針被生成,而這可用于多種雜交技術中。
特異性
靈敏度及特異性
DIG標記的RNA探針可在最di至1 μg的哺乳動物DNA中按照以下的檢測條件進行單拷貝基因的檢測:該雜交混合液包含20至100 ng標記探針/ml,而結合的探針可通過抗DIG-AP進行檢測并通過化學發光底物CDP-Star進行可視化。
熱滅活:添加 2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0) 終止反應。
應用
用于利用SP6及T7 DNA聚合酶通過體外轉錄而使用DIG-11-UTP進行RNA標記。DIG標記的“流失"轉錄本是以高效率進行合成的,并用于多種雜交技術:
Northern blots[1]
Southern blots
原位雜交[2][3][4]
菌斑或克隆提升
RNase保護試驗
由于高度特異性和敏感的檢測系統,DIG標記的探針可用于1μg 總人類DNA中單拷貝基因的檢測。
注意:由于DIG和UTP之間的連接對于堿具有抗性,DIG標記的RNA可通過堿處理進行片段化。略微降低DIG標記的RNA探針的大小可能會使其更為適合于原位雜交中的特定應用。
包裝
1個試劑盒包含12種組分。
質量
檢測原理:待轉錄的DNA模板將會被克隆至含有SP6及(或)T7 RNA聚合酶啟動子的合適轉錄載體的多接頭位點。當在合適位點進行線性化后,RNA在DIG-UTP的存在下進行了轉錄。在標準條件下,來自1μg 模板的約10μg的全長DIG標記RNA被轉錄。
其他說明
僅用于生命科學研究。不可用于診斷。
產品訂購信息:
Roche 11175025910 DIG RNA Labeling Kit (SP6/T7) 20 reactions