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如何正確使用反相色譜柱?

時(shí)間:2022-11-14 閱讀:2200
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根據(jù)流動(dòng)相和固定相相對(duì)極性不同,液相色譜分為正相色譜和反相色譜。流動(dòng)相極性大于固定相極性的情況,稱(chēng)為反相色譜。非極性鍵合相色譜可作反相色譜。
 
反相色譜柱是一種用于分離分析各種物質(zhì)的高效液相色譜分離柱。反相色譜柱具有高效、靈敏和選擇性好等優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于化工、醫(yī)藥、食品等工業(yè)領(lǐng)域以及環(huán)保監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。
 
使用方法:
 
1.先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積,再依次以相同的流速相同的用量用氯、異丙醇、甲醇、甲醇-水(50:50)沖柱子;
 
2.以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH11.0的氫氧化鈉(LUNA)水溶液沖柱子(注意pH值切不可超過(guò)11.0),立即用水(0.5ml/min的流速,30倍柱體積)沖洗,再換成流動(dòng)相;
 
3.配制流動(dòng)相時(shí),應(yīng)各組分分別量取,比例較小的組分要精密量取,需調(diào)pH值時(shí)要精密到0.1;
 
4.反相條件下使用時(shí),要特別注意控制pH值范圍,pH值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn),流動(dòng)相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)。理想的pH范圍在pH3.0-7.0;
 
5.如果要使用的流動(dòng)相中還含有緩沖鹽類(lèi),建議在用分析流動(dòng)相之前,先用不含緩沖鹽的同比例流動(dòng)相過(guò)渡,這樣可避免緩沖鹽在分析柱內(nèi)的析出。

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