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如果使用PCR板，可以更好的展開(kāi)實(shí)驗(yàn)

閱讀：1383 發(fā)布時(shí)間：2024-2-21

PCR板本身材質(zhì)在當(dāng)今主要以聚丙烯（PP）為主，能更好適應(yīng)PCR反應(yīng)過(guò)程中反復(fù)高低溫設(shè)定，并且能夠?qū)崿F(xiàn)高溫高壓滅菌操作。為配合排槍、PCR儀等實(shí)現(xiàn)高通量操作，較常使用的為96孔或384孔的PCR板。板型符合SBS國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，且為適應(yīng)不同廠家的PCR儀，根據(jù)裙邊設(shè)計(jì)又可分為無(wú)裙邊、半裙邊、升裙邊和全裙邊四種設(shè)計(jì)模式。

由于存在雜質(zhì)，會(huì)出現(xiàn)不正確的陽(yáng)性或陰性結(jié)果，提供一套干凈的設(shè)備，包括移液器和架子，專門用于PCR。在移液器、架子和長(zhǎng)凳上使用漂白劑、乙醇來(lái)擦去污染物。為所有PCR反應(yīng)分配預(yù)留空間，以進(jìn)一步減少顆粒污染。在每一步都使用干凈的手套并經(jīng)常更換。

要避免PCR板與產(chǎn)品過(guò)載。盡管希望同時(shí)運(yùn)行多個(gè)產(chǎn)品，但它會(huì)導(dǎo)致PCR板的交叉污染。用不同的產(chǎn)品使PCR板超載會(huì)浪費(fèi)，并且很難確定樣品。

在使用PCR板時(shí)，確認(rèn)熔解曲線的分析具有重要意義，因?yàn)樗沁x擇正確退火溫度的良好指標(biāo)。引物設(shè)計(jì)軟件輔助設(shè)計(jì)，提供正確的退火溫度，直接減少PCR板中的錯(cuò)誤。

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