cas：1239946-52-1，FM 4-64是一種膜選擇性紅色熒光染料，屬于苯乙烯基吡啶染料的 FM 家族，具有親脂性，能夠特異性結合細胞膜和內膜細胞器（如液泡膜、核膜、內質網等），并發出強烈的紅色熒光。以下是關于 FM 4-64 的詳細介紹：

一、基本信息

• 中文名：苯乙烯基染料 FM 4-64（或 NeurotransRed C2、SynaptoRed™ C2）

• 英文名：FM 4-64

• CAS 號：1239946-52-1

• 分子式：C??H??Br?N?

• 分子量：607.51

• 外觀性狀：紫色固體粉末

• 溶解性：溶于水、DMSO（二甲基亞砜）等大部分有機溶劑

• 儲存條件：-20℃ 避光干燥保存，避免反復凍融

結構式：

二、熒光特性

• 最大激發波長：558 nm

• 最大發射波長：734 nm

• 熒光強度：高熒光強度，適用于熒光顯微鏡、流式細胞儀等設備的觀察

• 熒光穩定性：具有良好的化學穩定性和光穩定性，可在實驗過程中保持穩定的熒光信號

三、作用機制

FM 4-64 是一種親脂性染料，其分子結構中的親脂性尾部（兩個碳鏈）和帶陽離子的高親水性頭部使其能夠插入脂膜表面。在水溶液中，FM 4-64 基本無熒光；但一旦與細胞膜或內膜細胞器結合，其熒光強度會顯著增強，從而實現對細胞膜和內膜細胞器的特異性標記。

四、應用領域

1. 細胞膜和內膜細胞器標記：

• FM 4-64 可用于標記活細胞或固定細胞的細胞膜、液泡膜、核膜、內質網等內膜細胞器，觀察其形態和動力學變化。

• 在酵母細胞中，FM 4-64 是研究液泡分裂、融合以及液泡蛋白質分揀蛋白突變體液泡形態的重要工具。

2. 胞吞和胞吐作用研究：

• FM 4-64 可用于示蹤酵母整體膜的內吞化和運輸到液泡的過程，研究胞吞和胞吐作用的機制。

• 通過觀察 FM 4-64 標記的膜結構的動態變化，可以揭示細胞內物質運輸和能量轉換的奧秘。

3. 囊泡運輸研究：

• FM 4-64 可用于標記囊泡膜，觀察囊泡的形成、運輸和融合過程，研究囊泡運輸的分子機制。

4. 細胞器組織研究：

• FM 4-64 可用于研究細胞器的組織結構和功能關系，揭示細胞器在細胞生命活動中的作用。

5. 雙色實時觀察：

• FM 4-64 與呈綠色熒光的 FM 1-43 在合適的濾片下能夠區分開，允許雙色實時觀察膜的再循環過程。

五、使用注意事項

1. 避光操作：

• FM 4-64 是一種熒光染料，對光敏感。在儲存、配制和使用過程中應嚴格避光，以防止熒光淬滅。

2. 避免反復凍融：

• FM 4-64 固體粉末在反復凍融過程中容易降解或失活。因此，應將儲存液分裝后保存，避免反復凍融。

3. 現配現用：

• FM 4-64 工作液應現配現用，以保證其熒光強度和穩定性。長時間放置會導致熒光淬滅或染料降解。

4. 控制濃度和孵育時間：

• 在使用 FM 4-64 進行細胞標記時，應控制染料的濃度和孵育時間。過高的濃度或過長的孵育時間可能導致非特異性標記或細胞毒性。

5. 注意細胞類型和實驗條件：

• 不同細胞類型對 FM 4-64 的敏感性和標記效果可能存在差異。因此，在使用前應進行預實驗，優化實驗條件。

六、優勢與局限性

• 優勢：

• 高熒光強度和穩定性：FM 4-64 具有高熒光強度和良好的光穩定性，適用于長時間觀察和動態過程研究。

• 特異性標記：FM 4-64 能夠特異性結合細胞膜和內膜細胞器，實現對這些結構的精確標記。

• 水溶性好：FM 4-64 具有良好的水溶性，便于實驗操作和制備。

• 與生物分子結合能力強：FM 4-64 可以與蛋白質、核酸等生物分子結合，為研究這些分子的功能和結構提供便利。

• 局限性：

• 熒光淬滅問題：所有熒光染料都存在淬滅問題，FM 4-64 也不例外。在保存和操作過程中應嚴格避光，以防止熒光淬滅。

• 細胞毒性：雖然 FM 4-64 對細胞無毒性或毒性較低，但在高濃度或長時間孵育條件下仍可能對細胞產生一定影響。因此，在使用時應注意控制染料的濃度和孵育時間。

cas：1239946-52-1，FM 4-64

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