核黃素-過氧化物酶標記物（Riboflavin-Peroxidase Conjugate，Riboflavin-HRP）是通過化學交聯技術將核黃素（維生素B?）與辣根過氧化物酶（HRP）結合形成的復合物，其核心特性與應用如下：

一、核心特性

1. 組成與結構

• 核黃素：作為維生素B族成員，是黃素單核苷酸（FMN）和黃素腺嘌呤二核苷酸（FAD）的前體，參與體內氧化還原反應和能量代謝。

• 辣根過氧化物酶（HRP）：一種含血紅素的糖蛋白，能催化過氧化氫（H?O?）分解，同時氧化酚類、胺類等底物，生成有色產物或熒光信號。

• 化學交聯：通過共價鍵（如Schiff堿反應）將核黃素與HRP結合，形成穩定復合物，保留雙方活性。

2. 物理化學性質

• 溶解性：溶于PBS（pH7.4）等緩沖液，含BSA及甘油作為穩定劑，防止酶變性。

• 穩定性：化學修飾后，HRP的熱穩定性、酸堿穩定性及耐有機溶劑能力顯著提升，延長標記物使用壽命。

• 活性：核黃素部分可參與氧化還原反應，HRP部分可催化顯色或熒光反應，實現信號放大。

二、制備方法

1. 過碘酸鹽氧化法（主流方法）

• 步驟：

• 需嚴格控制氧化劑濃度和反應時間，避免HRP過度氧化失活。

• 反應全程避光，防止光照加速氧化過程。

• 關鍵點：

1. 過碘酸鈉（NaIO?）氧化HRP表面的糖基，生成醛基。

2. 醛基與核黃素分子中的氨基（-NH?）反應，形成Schiff堿（-N=CH-）。

3. 用硼氫化na（NaBH?）還原Schiff堿，生成穩定的共價鍵（-CH?-NH-）。

2. 其他方法

• 戊二醛交聯法：通過雙功能試劑戊二醛連接核黃素與HRP，但可能引入非特異性結合，影響活性。

• 基因工程法：將核黃素結合肽段與HRP基因融合表達，但技術難度較高，尚未廣泛應用。

三、應用領域

1. 免疫檢測

• 原理：利用HRP催化底物（如TMB、OPD）顯色，通過比色法檢測核黃素或其抗體。

• 應用：

• 核黃素水平監測：評估人體營養狀況或疾病相關代謝變化。

• 抗體制備：作為免疫原，誘導產生針對核黃素的特異性抗體。

2. 生物傳感器開發

• 原理：將核黃素-HRP固定于傳感器表面，通過檢測HRP催化反應產生的電信號或光信號，實現核黃素定量分析。

• 優勢：高靈敏度、快速響應，適用于實時監測。

3. 蛋白質相互作用研究

• 原理：利用HRP的催化活性，結合鄰近標記技術（如APEX），標記與核黃素結合蛋白相互作用的鄰近分子。

• 應用：揭示核黃素在細胞內的代謝途徑及調控機制。

4. 藥物研發

• 原理：通過檢測核黃素-HRP與藥物分子的結合能力，篩選潛在藥物候選物。

• 優勢：高通量、低成本，加速藥物發現進程。

四、優勢與局限性

1. 優勢

• 信號放大：HRP的催化活性可顯著提高檢測靈敏度。

• 穩定性提升：化學修飾增強HRP的耐環境脅迫能力。

• 多功能性：適用于多種檢測平臺（如ELISA、Western blot、免疫組化）。

2. 局限性

• 背景干擾：核黃素自身可能參與氧化還原反應，需優化底物條件以降低非特異性信號。

• 制備復雜性：化學交聯需嚴格控制條件，避免影響活性。

• 成本：HRP及核黃素均為高純度試劑，制備成本較高。

關于我們:

陜西星貝愛科生物科技經營的產品種類包括有：合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性納米顆粒、納米金及納米金棒、近紅外熒光染料、活性熒光染料、熒光標記物、蛋白交聯劑、小分子PEG衍生物、點擊化學產品、樹枝狀聚合物、環糊精衍生物、大環配體類、熒光量子點、透明質酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳納米管、富勒烯，二氧化硅及介孔二氧化硅，聚合物微球，近紅外熒光染料，聚苯乙烯微球，上轉換納米發光顆粒，MRI核磁造影產品，熒光蛋白及熒光探針等等。

溫馨提示：供應產品僅用于科研，不能用于人體！

相關產品：

Biotin-L-Thyroxine，生物素-左旋甲狀腺素

Fitc-L-Thyroxine，綠色熒光素修飾左旋甲狀腺素

Biotin-PTX，生物素-紫杉醇

vitaminB5-Biotin維生素B5-生物素

Biotin-L-alanine，生物素-L-丙氨酸

Biotin-γ-mangostin生物素標記γ-倒捻子素

生物素標記新藤黃酸Biotin-neo-gambogic acid

生物素標記肌苷,Biotin-Inosine

生物素標記乳酸,Biotin-Lactic acid

生物素-淫羊藿次苷I,Biotin-Icariside I

生物素標記薯蕷皂甙Biotin-Dioscin

生物素標記人參二醇,Biotin-Panaxadiol