微量凱氏定氮法
在乳制品中的應用
凱氮應用
"
1
簡介
本文介紹了一種測定乳制品總蛋白質含量的簡便可靠的方法，按照“微氮"方法進行樣品消化，顯著減少了化學試劑和消耗品的使用，從而帶來了生態和經濟上的雙重優勢。使用全自動凱氏定氮儀 K-375 和進樣器 K-376 / K-377 按照標準進行蒸汽蒸餾，隨后進行電位滴定法進行滴定。
2
設備
尾氣吸收儀 K-415（114152331）
消解儀 K-449 （1154492000）
凱氏定氮儀 K-375/K-377（113751720）
樣品管 300 mL（037377）
分析天平（精度±0.1 mg）
3
化學品與材料
化學品：
濃度 98% 的硫酸，默克公司（1007482500）
凱氏定氮片（11057980）
32% NaOH
2% 硼酸，pH 值調至 4.65
硫酸 0.01mol/L
為確保安全操作，請注意所有相關的材料安全數據表（MSDS）！
標準樣品：
蛋白質含量標為每 3.7g/100g 酸奶
蛋白質含量標注為每 9.7g/100g 夸克奶酪
標簽上標明蛋白質含量為 32g/100g 帕爾馬干酪
4
實驗流程
4.1 消化方法 - 樣品
按照 表1 中的說明，將每個樣本放入 300mL 的樣品管中。
加入 2 片催化片和 8mL 濃度為 96% 的硫酸。
準備額外的空白和化學試劑，不包含樣品。
連接 K-415 與 K-449，以吸收消化過程中產生的酸性煙霧。
按照 表1 中所列參數啟動消解程序。
加熱步驟 | 溫度 [攝氏度] | 時間 [分鐘] |
預熱 | 350 | - |
1 | 420 | 120 |
冷卻 | - | 30 |
4.2 蒸餾與滴定
按照 表2 中所列參數蒸餾樣品。
表2： K-375/K-376 蒸餾和滴定的參數
4.3 計算
結果以氮的百分比計算得出。為了計算樣品中的蛋白質含量，需將氮含量乘以特定樣品的蛋白質系數。以下公式（1）、（2）和（3）用于計算結果。
5
結果
5.1 色氨酸的回收率
表3 列出了色氨酸分析（含量＞99%）的氮測定結果及回收率。色氨酸的理論氮含量為 13.72%?；厥章试?8% - 102% 的規定范圍內。
色氨酸 | mSample [g] | VSample [mL] | % NTry | 回收率 [%] |
示例 1 | 0.0283 | 14.220 | 13.53 | 98.65 |
示例 2 | 0.0302 | 15.289 | 13.67 | 99.67 |
平均值 [%] | - | - | 13.60 | 99.16 |
相對標準偏差（%） | - | - | 0.73 | 0.73 |
空白體積的平均值 (VBlank) 為 0.3985 mL（n = 2）。
5.1 乳制品中蛋白質的測定
乳制品中氮和蛋白質含量的測定結果見 表4 至 表6。
表4：酸奶中氮和蛋白質含量測定結果（標示蛋白質含量為 3.7g/100g）。
酸奶 | mSample [g] | VSample [mL] | % N | 百分比 P |
示例 1 | 0.258 | 6.821 | 0.68 | 4.34 |
示例 2 | 0.2545 | 6.306 | 0.63 | 4.04 |
示例 2 | 0.2702 | 6.591 | 0.63 | 4.00 |
平均值 [%] | - | - | 0.65 | 4.13 |
相對標準偏差（%） | - | - | 4.58 | 4.58 |
空白體積的平均值 (VBlank) 為 0.381 毫升（n = 2）。
表 5：夸克奶酪（標示蛋白質含量 9.7g/100g）中氮和蛋白質的含量。
夸克奶酪 | mSample [g] | VSample [mL] | % N | 百分比 P |
示例 1 | 0.1591 | 10.216 | 1.70 | 10.86 |
示例 2 | 0.179 | 10.94 | 1.63 | 10.37 |
示例 2 | 0.1444 | 9.019 | 1.64 | 10.48 |
平均值 [%] | - | - | 1.66 | 10.57 |
相對標準偏差（%） | - | - | 2.40 | 2.40 |
表6： 帕爾馬干酪中氮和蛋白質含量測定結果（標示蛋白質含量 32g/100g）
帕爾馬干酪 | mSample [g] | VSample [mL] | % N | 百分比 P |
示例 1 | 0.1261 | 22.684 | 4.92 | 31.37 |
示例 2 | 0.1168 | 20.877 | 4.88 | 31.10 |
示例 2 | 0.1411 | 25.052 | 4.86 | 31.03 |
平均值 [%] | - | - | 4.89 | 31.17 |
相對標準偏差（%） | - | - | 0.57 | 0.57 |
6
結論
使用消解儀 K-449 和全自動凱氏定氮儀 K-375 / K-376 通過電位滴定法測定乳制品中的氮和蛋白質， 可獲得可靠且重現性好的結果，相對標準偏差低（RSD）。微量凱氏定氮法減少了消解過程中硫酸和催化劑的用量，也減少了蒸餾步驟中 NaOH 的用量?；瘜W試劑用量的節省為經典凱氏定氮法帶來了經濟和生態方面的雙重優勢，同時又保持了其高精度和高準確度。
4
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務