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【瑞士步琦】通過SFC超臨界流體色譜分離純化甜葉菊提取物中甜菊苷的方法

閱讀:975      發(fā)布時間:2023-3-28
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分離純化甜葉菊提取物中甜菊苷


甜菊糖苷(結(jié)構(gòu)式見圖1 (b))屬于甜菊醇糖苷,甜菊糖苷是甜菊屬植物的甜味來源。甜菊糖的增甜能力比蔗糖的甜度高許多倍,因此是一種糖的替代品。自 2011 年以來,甜菊糖苷已被歐盟批準為食品添加劑 E960。甜葉菊本身還沒有被批準作為一種食品。


本文介紹了一種使用 BUCHI Sepiatec SFC 設備從甜葉菊提取物當中分離得到甜菊糖苷的方法。分離過程所使用食品級CO2、乙醇和水作為添加劑。


 1

實驗條件

設備

Sepiatec SFC-50

色譜柱

prep HPLC column Nucleodur Si 5um 250 x 4.0m

流動相種類

A=CO2(100%)

B=乙醇/水(95/5)

流動相條件

0-2min:95%A/5%B

2-25min:5-35%B

25-31min:35%B

樣品

200mg/mL 乙醇甜葉菊提取物


以 95%A/5%B,4mL/min流速條件對色譜柱平衡 5min。通過自動進樣器進樣并開始運行分離程序,UV檢測波長設定為 210nm,背壓調(diào)節(jié)閥設定為 150bar,柱溫箱溫度為 40℃,得到如下分離圖譜:


 圖1:(a)甜葉菊提取物的純化

以及(b)對 24 號組分進行 HPLC 純化分析


 2

結(jié)果與討論

圖1(a)展示了甜葉菊提取物的色譜圖,通過乙醇對甜葉菊進行提取得到了很多化合物,甜菊糖苷作為極性分子與色譜柱的極性固定相(Slica)發(fā)生了強烈的相互作用。因此,當流動相的整體梯度極性增加是,甜菊糖苷得以被洗脫。圖1(a)表明其純度非常高。除此之外,甜菊糖苷也是提取物中甜度最高的化合物,并且可從甜菊糖總甙中的甜菊雙糖苷中分離得到。


食品性質(zhì)的物質(zhì)提純一般更偏向于使用乙醇。反相色譜所使用的典型溶劑甲醇或乙腈往往與食品特性不太符合的。由于流動相整體極性的增加,所以水作為添加劑可以有效改善待測分析物的峰型。


 3

結(jié)論

使用制備型 SFC 可以有效地將甜菊糖苷從甜葉菊提取物中分離得到。通過 SFC 以及符合食品要求的溶劑可以對食品提取物進行純化




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