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熒光素標記鬼筆環肽

MCE 國際站：Fluorescein Phalloidin

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號：HY-K0902

中文名稱：熒光素標記鬼筆環肽

存儲條件：-20°C可穩定儲存至少6個月避光保存，避免反復凍融

產品活性：MCE 熒光素標記鬼筆環肽是一種高親和的 F-肌動蛋白探針，與綠色染料熒光素 (Fluorescein) 偶聯。

生物活性：鬼筆環肽 (Phalloidin) 是從鬼筆鵝膏中分離到的一種環狀七肽毒素，以極-高的親和力和特異性結合肌動蛋白絲 F-actins (actin filaments)。通常將鬼筆環肽與熒光染料偶聯來研究細胞中 F-actins 的分布。熒光標記的鬼筆環肽極少會非特異性染色，染色和未染色區域之間的對比度非常大，可使 F-actins 高效染色。 MCE 提供 3 種熒光標記的鬼筆環肽 (1000× Stock Solution in DMSO)，AMCA Phalloidin (HY-K0901，藍色熒光)、Fluorescein Phalloidin (HY-K0902，綠色熒光)和 Rhodamine Phalloidin (HY-K0903，橙色熒光)。這些鬼筆環肽衍生物可發出穩定、高亮度的熒光，染色反應特異性強，對比性高，適用于 F-actins 的定性和定量檢測實驗。

描述及優勢：

鬼筆環肽 (Phalloidin) 是從鬼筆鵝膏中分離到的一種環狀七肽毒素，以極-高的親和力和特異性結合肌動蛋白絲 F-actins (actin filaments)。通常將鬼筆環肽與熒光染料偶聯來研究細胞中 F-actins 的分布。熒光標記的鬼筆環肽極少會非特異性染色，染色和未染色區域之間的對比度非常大，可使 F-actins 高效染色。

MCE 提供 3 種熒光標記的鬼筆環肽 (1000× Stock Solution in DMSO)，AMCA Phalloidin (HY-K0901，藍色熒光)、Fluorescein Phalloidin (HY-K0902，綠色熒光)和 Rhodamine Phalloidin (HY-K0903，橙色熒光)。這些鬼筆環肽衍生物可發出穩定、高亮度的熒光，染色反應特異性強，對比性高，適用于 F-actins 的定性和定量檢測實驗。

操作流程：1. 準備 1× 熒光標記鬼筆環肽工作液 吸取 1 μL 1000× 熒光標記鬼筆環肽儲存液到 1 mL 含有 1% BSA 的 PBS 緩沖液中即可得到 1× 工作液。 注：a. 不同細胞染色情況不同，相應熒光標記鬼筆環肽的使用量需根據不同情況調整。 b. 1% BSA 的使用是為了降低非特異性的背景染色。 2. 細胞染色步驟 2.1 用 PBS 清洗細胞 2-3 次。用含有 3.7％ 甲醛的 PBS 溶液固定細胞，冰上固定 15 分鐘。 Note: 甲醇可以在固定過程中破壞肌動蛋白。因此最好避免含有任何甲醇的固定劑。優選的固定劑是不含甲醇的甲醛。 2.2 用 PBS 清洗細胞 2-3 次。 2.3 可選步驟：室溫下，用含 0.1％ Triton X-100 的 PBS 溶液透化細胞 3-5 分鐘，增加其通透性。用 PBS 清洗細胞 2-3 次。 2.4 按 100 μL/孔 (96 孔板)的加入量加入 1× 熒光標記鬼筆環肽工作液，室溫避光染色 20-90 分鐘。 2.5 用 PBS 清洗細胞 2-3 次，去除多余的熒光標記鬼筆環肽。 2.6 按每種熒光標記鬼筆環肽的最-佳推薦激發/發射波長，于熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進行熒光觀察 (AMCA Phalloidin, Ex/Em=344/432 nm；Fluorescein Phalloidin, Ex/Em= 497/516nm； Rhodamine Phalloidin, Ex/Em= 552/578 nm)。

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