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北京百泰派克生物科技有限公司
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化學蛋白組學的實驗流程與數(shù)據(jù)分析
  • 化學蛋白組學的實驗流程與數(shù)據(jù)分析
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地: 中國

更新時間:2025-08-06 20:03:03

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化學蛋白組學的實驗流程與數(shù)據(jù)分析檢測技術服務: 化學蛋白組學(Chemical Proteomics)是一種結合化學探針和高分辨質(zhì)譜分析的方法,能夠在原位、原態(tài)條件下系統(tǒng)地解析dànbáizhì的功能狀態(tài)、相互作用和小分子靶標。這一策略在藥物發(fā)現(xiàn)、酶功能研究、翻譯后修飾識別等領域具有廣泛應用價值。 本文將系統(tǒng)梳理化學蛋白組學的實驗流程與數(shù)據(jù)分析思路,幫助科研人員深入理解這一前沿技術,并探討如何借助

化學蛋白組學的實驗流程與數(shù)據(jù)分析檢測技術服務詳情介紹

化學蛋白組學(Chemical Proteomics)是一種結合化學探針和高分辨質(zhì)譜分析的方法,能夠在原位、原態(tài)條件下系統(tǒng)地解析dànbáizhì的功能狀態(tài)、相互作用和小分子靶標。這一策略在藥物發(fā)現(xiàn)、酶功能研究、翻譯后修飾識別等領域具有廣泛應用價值。本文將系統(tǒng)梳理化學蛋白組學的實驗流程與數(shù)據(jù)分析思路,幫助科研人員深入理解這一前沿技術,并探討如何借助zhuānyè平臺如百泰派克生物科技,高效推進相關研究。


一、什么是化學蛋白組學?

化學蛋白組學是基于可共價修飾dànbáizhì的化學探針(chemical probes),通過活性位點標記、親和富集與質(zhì)譜鑒定,實現(xiàn)對dànbáizhì功能狀態(tài)的全景描繪。

其核心優(yōu)勢在于:

1、特異性強:可設計特異性探針靶向某一類酶或結構基序(如sīānsuān水解酶、半guāngānsuān殘基等);

2、原位應用:能在細胞甚至動物水平上直接進行;

3、功能導向:不僅識別蛋白,還關注其活性狀態(tài)或小分子結合位點。


二、化學蛋白組學實驗流程解析

整個實驗流程通常包括以下關鍵步驟:

1、化學探針設計與合成

探針通常包括三部分:

(1)識別基團:與目標蛋白活性位點結合;

(2)可反應基團:與蛋白形成共價鍵;

(3)標簽結構:用于后續(xù)富集或熒光/光親和標記,如biotin、alkyne等。


常見探針類型:

(1)ABPP(Activity-Based Protein Profiling)探針

(2)Photoaffinity labeling 探針

(3)Covalent ligand 探針


2、樣本處理與探針標記

* 將探針添加至細胞裂解液或活細胞中,充分孵育;


  • 對照組加入非活性類似物或過量競爭小分子,用于鑒別特異性結合。


3、點擊化學修飾(Click Chemistry)

利用CuAAC反應將探針標記的alkyne結構與biotin-azide等進行共價連接,便于后續(xù)的富集步驟。


4、蛋白富集與酶切

* 通過鏈霉親和素磁珠進行富集;


  • 富集后的蛋白進行yídànbáiméi酶切,獲得可上機的肽段。


5、質(zhì)譜檢測(LC-MS/MS)

采用高分辨Orbitrap或Q-TOF質(zhì)譜平臺對肽段進行jīngquè檢測,獲取肽段序列、修飾位點及相對豐度信息。


在百泰派克生物科技,我們使用優(yōu)化的富集-酶切流程與Thermo Orbitrap Exploris等優(yōu)良質(zhì)譜平臺,確保化學蛋白組學實驗在靈敏度和重復性方面表現(xiàn)優(yōu)異。


三、數(shù)據(jù)分析策略

化學蛋白組學數(shù)據(jù)分析與常規(guī)dànbáizhì組學有所不同,需結合化學修飾位點和定量特征,常用流程包括:

1、數(shù)據(jù)預處理


  • 使用MaxQuant、Proteome Discoverer等軟件進行MS數(shù)據(jù)識別和定量;

  • 識別化學探針標記位點(如alkyne標簽位點);

  • 去除背景綁定(通過競爭組、空白組過濾)。


2、特異性結合蛋白篩選


  • 設定豐度比值(如DMSO對比探針標記組)閾值;

  • 結合統(tǒng)計學分析(如t-test, FDR校正)篩選高置信靶標。


3、功能注釋與通路富集


  • 利用DAVID、Metascape、STRING等工具,分析標記蛋白的分子功能、亞細胞定位、信號通路;

  • 揭示特定探針或小分子作用的生物學機制。


4、靶標驗證(可選)

進一步通過Western Blot、Co-IP或功能實驗證實核心靶蛋白的功能角色與結合關系。


四、應用案例:從機制研究到藥物開發(fā)

化學蛋白組學已經(jīng)在多個方向展現(xiàn)出強大的應用潛力:

1、新型藥物靶點發(fā)現(xiàn):識別小分子共價結合的dànbáizhì靶標(如KRAS G12C、BTK);

2、酶活性譜分析:通過ABPP探針評估細胞內(nèi)酶活性動態(tài)變化;

3、翻譯后修飾研究:檢測氧化、硝化、烷基化等修飾位點;

4、細胞應答機制探索:分析藥物或應激因子誘導的蛋白活性變化。


五、百泰派克生物科技:一站式化學蛋白組學解決方案

在百泰派克生物科技,我們提供從探針篩選建議、實驗方案定制、富集與上機、到數(shù)據(jù)分析與生物學解釋的全流程服務,助力您的科研項目快速推進:


  • 經(jīng)驗豐富的化學修飾蛋白組專家團隊

  • 高通量自動化樣本處理平臺

  • Orbitrap高分辨質(zhì)譜jīngzhǔn鑒定

  • 深度分析報告 + 生物學注釋支持


化學蛋白組學作為連接“結構-功能-靶點"研究的橋梁,正日益成為功能dànbáizhì組學的重要組成部分。它不僅揭示了dànbáizhì如何被調(diào)控,更為藥物靶標識別和機制闡明提供了dútè視角。如果您正關注某一小分子的蛋白靶標、某類酶的活性變化,或希望以功能為導向深入解析蛋白組學——歡迎聯(lián)系百泰派克生物科技,開啟您的專屬化學蛋白組學研究方案。


百泰派克生物科技特色項目


一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。


※服務優(yōu)勢:

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。



二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。


※服務優(yōu)勢:

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統(tǒng)準確。



三、單細胞質(zhì)譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內(nèi)部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質(zhì)量譜,zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。


※服務優(yōu)勢:

1.技術優(yōu)良,*技術空白

采用金屬標記抗體技術,避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大,成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,而流式質(zhì)譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質(zhì)譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外,質(zhì)譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。



四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。



五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務,幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。



百泰派克生物科技七大檢測平臺

化學蛋白組學的實驗流程與數(shù)據(jù)分析




百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質(zhì)譜多組學優(yōu)質(zhì)服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證,建立了完備的質(zhì)量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎的CRO檢測分析服務;

2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務;

3.業(yè)務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等;

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;

5.服務3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務!



化學蛋白組學的實驗流程與數(shù)據(jù)分析檢測技術服務詳情介紹


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