親和純化 - 質譜聯用檢測技術服務詳情介紹

親和純化 - 質譜聯用（Affinity Purification-Mass Spectrometry, AP-MS）是一種結合了特異性dànbáizhì分離技術與高靈敏度分子檢測技術的綜合方法，廣泛應用于dànbáizhì組學研究中。這一技術的基本思想是通過親和純化從復雜生物樣品中選擇性地分離目標dànbáizhì及其相關分子，然后利用質譜分析對分離的分子進行鑒定和定量。親和純化依賴于目標蛋白與其結合分子之間的高特異性相互作用，例如抗體與抗原、配體與受體、或shēngwùsù與鏈霉親和素，這種高效的分離手段確保了目標蛋白及其相互作用分子的富集；而質譜分析通過測量分子的質量和豐度信息，為研究者提供了目標蛋白復合物的組成及其相互作用網絡的全景視圖。親和純化 - 質譜聯用不僅是研究dànbáizhì相互作用的有力工具，更是一種解析生物分子復雜動態網絡的通用技術。在基礎生命科學研究中，該技術被用來探究dànbáizhì復合物的功能組成、信號通路的動態變化，以及翻譯后修飾的影響；在應用研究中，它為新型藥物靶點的發現、疾病相關分子的鑒定及功能驗證提供了有力支持。與傳統dànbáizhì研究方法（如共聚焦顯微鏡或dànbáizhì免疫印跡）相比，親和純化 - 質譜聯用的優勢在于其高靈敏度、高通量和廣覆蓋性，能夠捕捉細胞環境中的低豐度蛋白及其伴隨分子，進而揭示分子調控的潛在機制。近年來，該技術的進步使得我們能夠以更高的jīngquè度解析動態的dànbáizhì相互作用網絡，從而為揭示細胞活動的機制和疾病的病理過程提供了qiánsuǒwèiyǒu的洞察。

一、親和純化 - 質譜聯用的技術原理與關鍵步驟

親和純化 - 質譜聯用的成功依賴于兩個關鍵技術環節：親和純化和質譜分析。

1、親和純化

親和純化是親和純化 - 質譜聯用的dìyī步，其核心在于通過目標蛋白與特定結合物之間的高特異性相互作用，從復雜的生物樣品中富集目標蛋白及其相關分子。該步驟通常包括以下幾種方法：

（1）抗體依賴的親和純化：使用特異性抗體識別目標蛋白或蛋白標簽（如FLAG、HA、His標簽）進行親和純化。

（2）配體-受體親和純化：使用天然配體或合成分子捕獲目標蛋白，例如利用DNA、RNA或小分子化合物結合特定dànbáizhì。

（3）標記輔助親和純化：為目標蛋白引入shēngwùsù標簽，利用鏈霉親和素的高親和性實現分離。

在親和純化過程中，為減少背景噪聲，需優化洗滌條件，去除非特異性結合的分子，并確保目標蛋白復合物的完整性。

2、質譜分析

純化后的dànbáizhì復合物通過酶解（通常為yídànbáiméi）轉化為肽段，然后通過質譜分析實現高靈敏度檢測。常用的質譜方法包括：

（1）液相色譜-質譜聯用（LC-MS/MS）：通過液相色譜對肽段進行分離，再結合串聯質譜（MS/MS）對其進行鑒定。

（2）定量質譜：包括biāojìdìng量（如SILAC、TMT/iTRAQ）和無標定量（如基于光譜計數或峰面積的定量），實現對dànbáizhì豐度的比較分析。

質譜結果通常經過zhuānyè的生物信息學工具進行解析，如數據庫搜索（Mascot、Sequest）和統計分析，從而獲得dànbáizhì組信息。

二、應用與研究價值

親和純化 - 質譜聯用技術在多個研究領域具有廣泛應用，以下是其主要方向：

1、dànbáizhì相互作用網絡解析

親和純化 - 質譜聯用能夠揭示目標蛋白與其他dànbáizhì之間的物理或功能相互作用，從而構建相互作用網絡。這對理解dànbáizhì在細胞信號傳導、代謝調控和病理過程中的作用尤為重要。例如，通過這項技術，研究者發現了許多疾病相關的dànbáizhì相互作用網絡，為靶向治療提供了新思路。

2、dànbáizhì復合物組成分析

細胞中許多生物學功能是由dànbáizhì復合物協同完成的，該技術不僅能夠富集目標蛋白，還能鑒定其復合物的具體組成，為理解分子機制提供了重要線索。

3、翻譯后修飾研究

結合特異性修飾抗體（如磷酸化抗體），親和純化 - 質譜聯用可用于研究dànbáizhì翻譯后修飾的動態變化及其對dànbáizhì功能的調控。

4、藥物靶點篩選與驗證

在藥物研發中，親和純化 - 質譜聯用技術被用來確認藥物的靶點及其作用機制，同時篩選藥物干預后dànbáizhì相互作用的變化。

三、注意事項與挑戰

親和純化 - 質譜聯用的結果準確性依賴于嚴格的實驗設計與操作。以下是常見的挑戰與注意事項：

1、非特異性結合

在親和純化過程中，非目標dànbáizhì可能通過非特異性結合進入復合物中，需要優化實驗條件以減少背景噪聲。

2、樣品損失與降解

樣品制備時需加入蛋白酶抑制劑，避免dànbáizhì降解。同時，應使用溫和的裂解條件保護dànbáizhì復合物的完整性。

3、質譜靈敏度與覆蓋率

對低豐度蛋白的檢測可能受到限制，需結合高靈敏度質譜儀或進一步優化樣品分離策略。

百泰派克生物科技利用優良平臺和技術為客戶提供從實驗設計到數據分析的全流程服務，我們的技術團隊嚴控實驗過程，確保高質量數據輸出，助力您的科研探索，為生命科學研究和技術開發創造更多可能性。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優勢：

1.采用目前世界上優良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析，發現新的生物標記物;

2.體內體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統準確。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜，zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。

※服務優勢：

1.技術優良，*技術空白

采用金屬標記抗體技術，避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現了數量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務，幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質譜多組學優質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系，數據冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系，zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務；

3.業務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!

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