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北京百泰派克生物科技有限公司
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抗體的N端和C端是什么?精準(zhǔn)測(cè)序幫您解決

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抗體的N端和C端是什么?jīngzhǔn測(cè)序幫您解決結(jié)構(gòu)難題檢測(cè)技術(shù)服務(wù): 抗體(Antibody)作為免疫系統(tǒng)的核心效應(yīng)分子,在疾病診斷、藥物開(kāi)發(fā)及靶向治療等領(lǐng)域中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。隨著抗體藥物市場(chǎng)的快速擴(kuò)張,研究者對(duì)其結(jié)構(gòu)的認(rèn)知與解析也提出了更高要求。本文將聚焦抗體分子的N端和C端結(jié)構(gòu),并深入探討如何借助jīngzhǔn蛋白測(cè)序技術(shù)解決抗體結(jié)構(gòu)解析中的關(guān)鍵難題。   什么是抗體的N端和C

抗體的N端和C端是什么?精準(zhǔn)測(cè)序幫您解決結(jié)構(gòu)難題檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

抗體(Antibody)作為免疫系統(tǒng)的核心效應(yīng)分子,在疾病診斷、藥物開(kāi)發(fā)及靶向治療等領(lǐng)域中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。隨著抗體藥物市場(chǎng)的快速擴(kuò)張,研究者對(duì)其結(jié)構(gòu)的認(rèn)知與解析也提出了更高要求。本文將聚焦抗體分子的N端和C端結(jié)構(gòu),并深入探討如何借助jīngzhǔn蛋白測(cè)序技術(shù)解決抗體結(jié)構(gòu)解析中的關(guān)鍵難題。


一、什么是抗體的N端和C端?從結(jié)構(gòu)層面看本質(zhì)

抗體是一類由兩條重鏈(Heavy Chain)和兩條輕鏈(Light Chain)通過(guò)二硫鍵連接而成的免疫球蛋白。每條鏈都是由氨基酸組成的線性多肽,從N端(氨基端)開(kāi)始,到C端(羧基端)結(jié)束。

?? N端(N-terminus):功能識(shí)別的起點(diǎn)

N端是dànbáizhì的起始點(diǎn),對(duì)應(yīng)氨基酸序列中dìyī個(gè)氨基酸的自由氨基??贵w的N端通常位于可變區(qū)(Variable region),這一部分直接參與抗原識(shí)別。


  • 功能意義:N端序列高度多樣,是決定抗體特異性和親和力的關(guān)鍵。

  • 研究挑戰(zhàn):N端常包含修飾(如乙酰化、信號(hào)肽殘留)或在翻譯后被截短,傳統(tǒng)方法難以完整解析。


?? C端(C-terminus):結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的終點(diǎn)

C端是dànbáizhì的終止點(diǎn),對(duì)應(yīng)序列中zuì后一個(gè)氨基酸的羧基??贵w的C端通常位于恒定區(qū)(Constant region),負(fù)責(zé)介導(dǎo)免疫效應(yīng),如與Fc受體結(jié)合或激活補(bǔ)體系統(tǒng)。


  • 功能意義:決定抗體亞型(如IgG1、IgG2)及其生物學(xué)功能,如半衰期、免疫激活能力。

  • 研究挑戰(zhàn):C端同樣可能存在修飾(如糖基化、截短),影響下游功能和質(zhì)量控制。


二、抗體結(jié)構(gòu)難題為何難解?傳統(tǒng)手段的局限性

盡管抗體基因序列可以通過(guò)高通量測(cè)序獲得,但蛋白水平的實(shí)際結(jié)構(gòu)往往與基因編碼并不wánquán一致。這主要?dú)w因于:


  • 翻譯后修飾(PTMs):如糖基化、羥化、去?;龋赡苡绊懣贵w的穩(wěn)定性與功能;

  • 加工變異:如信號(hào)肽未wánquán剪切、氨基酸截?cái)?、異?gòu)體混雜;

  • 表達(dá)系統(tǒng)差異:不同細(xì)胞系(如CHO、人源293)表達(dá)出的抗體可能在N/C端有差異;

  • 標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)手段不足:常規(guī)SDS-PAGE、Western Blot無(wú)法提供氨基酸分辨率的信息。


因此,僅靠基因信息或粗略檢測(cè),難以實(shí)現(xiàn)抗體N端和C端的jīngquè定性與定量分析。


三、jīngzhǔn蛋白測(cè)序:破解抗體結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵wǔqì

在此背景下,dànbáizhìN/Cduāncèxù技術(shù)成為抗體研究和質(zhì)控的突破口。以質(zhì)譜(Mass Spectrometry, MS)為核心的蛋白測(cè)序方法,能夠?qū)崿F(xiàn)亞單體級(jí)別的端點(diǎn)解析與翻譯后修飾識(shí)別。

?? Nduāncèxù:解碼抗原結(jié)合的dìyī位氨基酸


  • 方法路徑:通過(guò)化學(xué)衍生/酶解結(jié)合高分辨質(zhì)譜,鎖定真實(shí)的N端位置與修飾;

  • 適用場(chǎng)景:識(shí)別Fab區(qū)結(jié)構(gòu)、驗(yàn)證信號(hào)肽剪切位點(diǎn)、篩選抗體庫(kù);

  • 技術(shù)優(yōu)勢(shì):可區(qū)分真實(shí)N端與內(nèi)肽斷裂位點(diǎn),支持低豐度蛋白分析。


?? Cduāncèxù:構(gòu)建穩(wěn)定構(gòu)象的結(jié)構(gòu)錨點(diǎn)


  • 方法路徑:采用特異酶解法(如Carboxypeptidase B/Y)結(jié)合MS/MS,定位C端殘基及其修飾;

  • 適用場(chǎng)景:確定抗體亞型、分析Fc區(qū)變體、驗(yàn)證工藝一致性;

  • 技術(shù)優(yōu)勢(shì):識(shí)別C端修飾(如酰胺化、糖基化),對(duì)比批次間一致性。


抗體的N端和C端,不僅是結(jié)構(gòu)的起始與終點(diǎn),更是決定其功能與藥效的“密碼"。在抗體工程和藥物開(kāi)發(fā)的浪潮下,唯有深入理解并jīngzhǔn解析這些“端點(diǎn)信息",才能從源頭保障抗體分子的質(zhì)量與一致性。百泰派克生物科技致力于提供高質(zhì)量的dànbáizhìN/Cduāncèxù服務(wù),歡迎隨時(shí)聯(lián)系我們的技術(shù)團(tuán)隊(duì)獲取定制化解決方案。


百泰派克生物科技特色項(xiàng)目


一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析,提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù),包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù),對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。


※服務(wù)優(yōu)勢(shì):

1.采用目前世界上先進(jìn)的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。



二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù),助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。


※服務(wù)優(yōu)勢(shì):

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法,適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白,線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析,分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。



三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,采用金屬元素標(biāo)記物(通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體)標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子,然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞,再用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜,zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。


※服務(wù)優(yōu)勢(shì):

1.技術(shù)先進(jìn),填補(bǔ)技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù),避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題。可在單細(xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征,百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大,成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右,而流式質(zhì)譜技術(shù)一次(單樣本)就可分析至少10^5的細(xì)胞,實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高,且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景;

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外,質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾;

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。



四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析,可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標(biāo)。



五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù),MALDI TOF,高效色譜分離技術(shù),提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析,到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù),幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。



百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

抗體的N端和C端是什么?精準(zhǔn)測(cè)序幫您解決




百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則,通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證,建立了完備的質(zhì)量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設(shè)備定期計(jì)量/期間核查,軟件審計(jì)追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù),支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù);

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù);

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等;

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái),滿足您一站式服務(wù)需求;

5.服務(wù)3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!



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