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MS/MS在多肽測序中的核心作用與流程解

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品       牌百泰派克

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更新時間:2025-07-10 09:04:13瀏覽次數:56次

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MS/MS在多肽測序中的核心作用與流程解析檢測技術服務: 多肽測序(Peptide Sequencing)通過測定dànbáizhì中肽段的氨基酸序列,科學家們能夠全面解析蛋白的功能、修飾及其在生命過程中的作用。隨著高分辨質譜與計算算法的飛速發展,多肽測序不僅推動了蛋白組學的深入發展,更在疾病機制研究、藥物研發、臨床診斷等領域發揮著舉足輕重的作用。串聯質譜(Tandem Mass Spectrom

MS/MS在多肽測序中的核心作用與流程解析檢測技術服務詳情介紹

多肽測序(Peptide Sequencing)通過測定dànbáizhì中肽段的氨基酸序列,科學家們能夠全面解析蛋白的功能、修飾及其在生命過程中的作用。隨著高分辨質譜與計算算法的飛速發展,多肽測序不僅推動了蛋白組學的深入發展,更在疾病機制研究、藥物研發、臨床診斷等領域發揮著舉足輕重的作用。串聯質譜(Tandem Mass Spectrometry, MS/MS),憑借其高靈敏度、zhuóyuè的分辨率、序列解析能力和修飾識別優勢,已成為多肽測序領域的核心技術。未來,隨著質譜技術、AI算法和多維數據整合的不斷進步,MS/MS在多肽測序中的核心作用與流程解析將在生命科學、jīngzhǔn醫學和生物制藥中扮演更加重要的角色。


一、MS/MS在多肽測序中的核心作用

MS/MS不僅是多肽鑒定的關鍵手段,更是實現肽段序列解析、翻譯后修飾定位、異構體區分和復雜樣本解析的核心工具。其主要作用體現在:

1、提供肽段氨基酸序列信息

通過分析母離子(前體肽段)的碎片離子(b、y系列),推導完整氨基酸序列。


2、jīngzhǔn定位翻譯后修飾(PTMs)

如磷酸化、糖基化、乙酰化等修飾位點的識別與定位,解析蛋白功能調控機制。


3、區分同分異構體和序列異構肽段

通過高分辨碎片譜和保留時間結合,提高同序列不同結構肽段的解析能力。


4、分析復雜生物樣品中的低豐度肽段

結合LC(液相色譜)和高分辨質譜,實現復雜樣本中低豐度肽段的jīngzhǔn檢測。


二、MS/MS多肽測序的詳細流程解析

MS/MS多肽測序流程主要包括 樣品前處理、酶解、分離、離子化、母離子選擇、碎片化、質譜檢測、數據解析 八大步驟,每一環節都對實驗結果質量起著決定性作用。

1、樣品前處理與蛋白酶解

(1)蛋白提取與純化:采用裂解液(含去垢劑、鹽、緩沖液)提取蛋白,結合超聲或機械破碎提高效率。

(2)定量與質量控制:BCA、Bradford或紫外分光法定量,確保濃度適中,避免抑制離子化。

(3)酶解:常用yídànbáiméi(Trypsin),按1:501:100酶:底物比例,在37°C下酶解1216小時。對疏水肽段,可結合LysC、GluC等多酶策略。


2、液相色譜分離(LC)

(1)反相液相色譜(RP-LC):利用疏水性差異分離肽段,降低樣品復雜度,提高信噪比。

(2)納升級流動相:配合納流LC(nano-LC),實現低流速、高分離度,適合質譜分析。


3、離子化(電噴霧/基質輔助)

(1)電噴霧電離(ESI):將液相中的肽段霧化為帶電離子,適合與LC在線耦合。

(2)MALDI(用于離線):適用于樣品量少、復雜度低的樣本,但MS/MS中較少采用。


4、 母離子選擇與碎片化

(1)母離子選擇:根據m/z選擇特定肽段作為前體離子。可設定動態排除,避免重復掃描。

(2)碎片化模式包括:


  • CID(碰撞誘導解離):與惰性氣體碰撞產生b、y離子。

  • HCD(高能碰撞解離):更高能量碎片化,生成更豐富碎片。

  • ETD/ECD(電子轉移/俘獲解離):保留修飾位點,適合磷酸化、糖基化等修飾解析。


5、 碎片離子檢測與質譜分析

(1)高分辨質譜儀:Orbitrap、FTICR等提供亞ppm質量精度,確保序列解析和修飾定位準確。

(2)動態范圍與靈敏度:AGC(自動增益控制)、動態排除等策略,提升低豐度肽段檢測能力。


6、 數據分析與序列解析

(1)數據庫搜索:利用Mascot、MaxQuant、Byonic等軟件,將碎片譜與理論肽段匹配。需設置質量偏差(MS1:±10 ppm;MS2:±0.02 Da)和修飾類型(如磷酸化、氧化)。

(2)de novo測序:當數據庫中無參考序列時,直接推導氨基酸序列。

(3)修飾定位:結合碎片離子間質量差異和離子強度,jīngquè定位PTMs。

(4) 多引擎與AI輔助分析:引入深度學習和多引擎結果交叉驗證,提高復雜樣本解析能力。


三、MS/MS在多肽測序中的應用與未來趨勢

1、蛋白zhìzǔxué:在血漿、組織、細胞裂解液中高通量解析蛋白組,應用于疾病機制研究和新靶點發現。

2、翻譯后修飾解析:定位關鍵修飾位點,揭示信號轉導、代謝調控等功能機制。

3、新抗原與生物標志物發現:MS/MS助力腫瘤miǎnyìzhìliáo、疫苗設計、疾病早篩。

4、單細胞與空間質譜發展:推動在單細胞、組織空間層次上進行肽測序,揭示生物學復雜性。

5、AI與多技術融合:結合深度學習、質譜成像(MSI)、原位分析(DESI-MS)等,推動多肽測序走向自動化、超高分辨率與多維數據整合。


百泰派克生物科技在多肽測序領域擁有*的技術平臺(Orbitrap Fusion Lumos、Q-Exactive HF-X、ETD/ECD模塊、MALDI-TOF/TOF)和自主研發的數據處理算法:全流程MS/MS測序服務,從樣品制備、酶解優化到質譜檢測、數據解析,全鏈路定制化服務。高靈敏度與分辨率,gāoduān儀器保障低豐度、多修飾肽段的準確檢測。AI輔助與多引擎分析,結合MaxQuant、Byonic、深度學習算法,提高復雜樣品識別能力和結果精度。zhuānyè技術團隊支持,經驗豐富的科學家團隊,解決從樣品到結果的各類挑戰,助力客戶jīngzhǔn解析蛋白zhìzǔxué奧秘。致力于為全球科研人員與企業客戶提供高質量、多維度的多肽測序解決方案,共同推動蛋白組學與生物醫藥的創新進步。


百泰派克生物科技特色項目


一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。


※服務優勢:

1.采用目前世界上*的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。



二、蛋白zhìzǔxué

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量蛋白zhìzǔxué、bǎxiàngdàn白zhìzǔxué、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白zhìzǔxué分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白zhìzǔxué服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。


※服務優勢:

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析,發現新的生物標記物;

2.體內體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統準確。



三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。


※服務優勢:

1.技術*,*技術空白

采用金屬標記抗體技術,避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數量大,成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現了數量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。



四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。



五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務,幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。



百泰派克生物科技七大檢測平臺

MS/MS在多肽測序中的核心作用與流程解




百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質譜多組學優質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數據冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系,zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務;

2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務;

3.業務范圍覆蓋蛋白zhìzǔxué、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等;

4.七大質量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;

5.服務3000+企業,10000+客戶的選擇;

6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!



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