當前位置:北京百泰派克生物科技有限公司>>檢測技術服務>>蛋白分析>> CD光譜 vs FTIR:哪種技術更適合
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dànbáizhì的結構決定其功能,而二級結構是dànbáizhì結構層級中的關鍵環節。螺旋、折疊、無規卷曲等結構變化,常常伴隨著dànbáizhì功能的轉變,甚至失活。因此,jīngzhǔn解析dànbáizhì二級結構,不僅對于基礎研究至關重要,也廣泛應用于藥物研發、生物制劑穩定性評估以及結構功能關系研究等領域。目前,圓二色譜(CD光譜)和傅里葉變換紅外光譜(FTIR)是zuì常用于dànbáizhì二級結構分析的兩種光譜技術。它們各具優勢,也各有局限。那么,究竟哪一種更適合你的研究需求?
一、CD光譜:快速、靈敏,但依賴于樣本純度
1、原理與優勢
CD光譜利用圓偏振光與手性分子之間的相互作用來分析dànbáizhì的構象。α-螺旋、β-折疊和無規卷曲結構在190–250 nm波長范圍內表現出特征性CD信號,因此通過擬合參考光譜庫,可快速估算各類二級結構的比例。CD光譜尤其適用于以下場景:
動態監測dànbáizhì在不同pH、溫度或溶劑條件下的構象變化
對于單一構象蛋白,獲取清晰的二級結構分布
可在較低樣品濃度下進行測定(通常為0.1–1 mg/mL)
2、局限性
盡管CD光譜靈敏度高,但也對樣品質量要求嚴格,尤其對雜質、緩沖液吸收和非dànbáizhì背景干擾較為敏感。此外,CD譜圖的解釋依賴于參考數據庫擬合算法,難以用于混合構象或高復雜度樣品的jīngquè解讀。
二、FTIR:穩定性強、適用性廣,但分辨率有限
1、原理與優勢
FTIR通過檢測分子振動吸收,尤其是酰胺I帶(約1600–1700 cm?1)的吸收峰,來推斷dànbáizhì的二級結構。這一區間對α-螺旋、β-折疊和無規卷曲的振動模式高度敏感。FTIR具有以下優點:
能夠分析固態、液態甚至凍干dànbáizhì樣品
對緩沖液成分不敏感,適用于復雜基質
適合高濃度樣品,尤其適用于藥物制劑中的結構評估
與溫度控制配合,可用于熱穩定性研究
2、局限性
盡管FTIR適用范圍廣,但其二級結構定量精度相對較低,且在多組分重疊峰區域,結構分辨率受限。此外,水對酰胺I區的吸收干擾需通過專門方法(如差譜技術)加以校正。
三、CD光譜 vs FTIR:如何選擇?
四、實踐建議:以目標為導向,選用或聯合技術
在dànbáizhì二級結構研究中,并不存在“zuì優技術",只有“zuì合適方法"。如果研究目標是快速篩查構象變化,CD光譜無疑是優選;若需要在復雜背景或高濃度樣品中評估結構穩定性,則FTIR更具優勢。值得強調的是,兩者并非對立,而是互補 —— 許多研究也采用CD與FTIR聯合策略,以獲得更全面、準確的結構信息。
在dànbáizhì二級結構分析實踐中,實驗設計、樣品處理、譜圖解析等每一步都對數據質量至關重要。百泰派克生物科技依托*的質譜平臺,提供dànbáizhì圓二色譜分析服務。我們的技術團隊能夠根據客戶研究目標定制zuì優實驗方案,助力科研與開發高效推進。
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優勢:
1.采用目前世界上*的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析,發現新的生物標記物;
2.體內體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統準確。
百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。
※服務優勢:
1.技術*,*技術空白
采用金屬標記抗體技術,避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現了數量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應用前景大
①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務,幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數據冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。
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