樣品收集、處理及保存方法：斑馬魚雌激素(E)ELISA檢測試劑盒 課題研究

1.  血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

3.  細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被雌激素（E）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雌激素（E）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

斑馬魚雌激素(E)ELISA檢測試劑盒 課題研究試劑盒組成:

注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0、5、10、20、40、80 pg/mL

關于ELISA試劑盒操作常見的問題，上海軒澤康生物一一為您解答：

1. 一次ELISA實驗需要多長時間？

答：雙抗體夾心ELISA法一次實驗需要3。5-4小時，競爭ELIA法一次實驗需要2-2.5小時

2. 為什么有的試劑盒是采用競爭ELISA法？

答:小分子抗原或半抗原因為缺乏可作夾心法的兩個以上的位點，因此不能用雙抗體夾心法進行測定，可以采用競爭法。其原理是標本中的抗原和固相載體上的抗原競爭生物su化抗體上的結合位點，標本中抗原量含量愈多，結合在固相上的生物su化抗體愈少，*的顯色也愈淺。即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激素等ELISA測定多用此法。

3. 試劑盒做的結果不理想怎么辦？

答：實驗結果不理想請及時與客服或技術支持取得聯系，我們可以幫助您一起分析實驗結果。如果僅憑實驗數據無法判斷，您可以將試劑盒發回我們進行售后檢測。