兔白細胞介素1β（IL-1β）酶聯(lián)免疫試劑盒
規(guī)格：96T/48T
產(chǎn)品用途：科研 實驗
公司服務(wù)：ELISA試劑盒 免費代測
兔白細胞介素1β（IL-1β）酶聯(lián)免疫試劑盒
1試劑的準備
按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保存。
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)（C－ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)） C－ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)（Cloth-ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)）是加拿大學者Blais, B. W.等于1989年建立的一種新型免疫檢測技術(shù)。該方法是以疏水性聚脂布（Hydrophobic Polyester Cloth）即滌綸布為固相載體，這種大孔徑的的疏水布具有吸附樣品量大，可為免疫反應(yīng)提供較大的表面積，提高反應(yīng)的敏感性，且容易洗滌，不需特殊儀器等優(yōu)點。其基本原理與Dot-ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)類似，只是載體不同。以對布氏桿菌抗原的檢測為例，C－ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)的主要程序為：
(1) 首先把抗布氏桿菌的血清包被（吸附）在聚脂布上，并經(jīng)洗滌及封閉；
(2) 加被檢樣品并于室溫下感作30分鐘，然后洗5次；
(3) 加酶標記的抗布氏桿菌抗體，于室溫下感作30分鐘，然后洗滌5次；
(4) 加入底物液顯色；
(5) 利用酶標儀測定OD值。
吸附測定
1 標本的采取和保存
可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清自然凝固。除特殊情況外，在醫(yī)學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。
血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強烈振蕩?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢吮緫?yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應(yīng)注意無菌操作，也可加入適當防腐劑。
2 試劑的準備
按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保存。
