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前動(dòng)力蛋白2(PK2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法

1971年瑞典學(xué)者Engvall和Perlmann,荷蘭學(xué)者Van Weerman和Schuurs分別報(bào)道將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測(cè)體液中微量物質(zhì)的固相免疫測(cè)定方法，即酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 。ELISA已成為分析化學(xué)領(lǐng)域中的前沿課題 ，它是一種特殊的試劑分析方法，是在免疫酶技術(shù)( immunoenzymatic techniques ) 的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測(cè)定技術(shù) 。

中文名

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法

外文名

Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA

別名

ELISA法

發(fā)現(xiàn)者

Van Weerman

原理

抗體與酶復(fù)合物結(jié)合顯色

前動(dòng)力蛋白2(PK2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

試劑

（1）　包被緩沖液（PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液）:

Na2CO3 1.59克

NaHCO3　 2.93克

加蒸餾水至1000ml

（2）　洗滌緩沖液（PH7.4PBS）：0.15M

KH2PO4 　0.2克

Na2HPO4·12H2O　2.9克

NaCl　8.0克

KCl　0.2克

Tween-20　0.05%　0.5ml

加蒸餾水至1000ml

（3）　稀釋液：

牛血清白蛋白（BSA） 0.1克

加洗滌緩沖液至100ml

或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用。

（4）　終止液（3M　H2SO4）：

蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸（98%）21.7ml。

（5）　底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:

0.2MNa2HPO4（28.4克/L）25.7ml

0.1M檸檬酸（19.2克/L）　 24.3ml

加蒸餾水50ml。

（6）　TMB（四甲基聯(lián)苯胺）使用液:

TMB（10mg/5ml無水乙醇）0.5ml

底物緩沖液（PH5.5）　 10ml

0.75%H2O2　 　32μl

（7）　ABTS使用液:

ABTS　0.5mg

底物緩沖液（PH5.5）　 1ml

3%H2O2　 　2μl

（8）　抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。

（9）　正常人血清和陽性對(duì)照血清。

器材

（1）　聚苯乙烯塑料板（簡(jiǎn)稱酶標(biāo)板）40孔或96孔，ELISA檢測(cè)儀，50μl及100μl加樣器，塑料滴頭，小毛巾，洗滌瓶。

（2）　小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。

（3）　4℃冰箱，37℃孵育箱。