間接法

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜；

2.次日洗滌3次；

3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌；

4.（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml；

5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌；

6.’最后一遍用DDW洗滌。

其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

規(guī)格：96T/48T

產(chǎn)品用途：科研 實驗

公司服務(wù)：ELISA試劑盒 免費代測

經(jīng)營品牌：RD

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：2-8℃。

2．有效期：6個月

運輸條件：低溫運輸，用干冰或者冰袋低溫運輸。

安全性

1．避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2．實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。

3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作實驗要點：

專一性強：抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng)。

靈敏度高：大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。

樣品易保存：經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。

結(jié)果易觀察：對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計進行比色測定，還可用顯微鏡觀察。

ELISA 酶結(jié)合物的制備：

 免疫酶技術(shù)又稱酶免疫測定法,是繼免疫熒光技術(shù)和放射免疫技術(shù)后發(fā)展起來的又一種免疫標記技術(shù)。

 它是把抗原抗體的特異性反應(yīng)和酶的高效催化作用相結(jié)合而建立的。

 技術(shù)通過化學(xué)方法將酶與抗體或抗抗體結(jié)合，形成酶標記物，這些酶標記物仍保持免疫學(xué)活性和酶的活性。

 然后將它與相應(yīng)的抗體或抗原起反應(yīng)，形成酶標記復(fù)合物，結(jié)合在免疫復(fù)合物上的酶，在遇到相應(yīng)的底物時，則催化底物產(chǎn)生水解、氧化或還原等反應(yīng)，而生成可溶性或不溶性有色物質(zhì)。

 然后根據(jù)顯色的深淺來反映待測樣品中抗原或抗體的含量，如生成的有色物質(zhì)為可溶性，則可用肉眼比色或酶標測定儀測定光密度值（OD）定性或定量。