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CAS | 酶聯免疫法 | 純度 | 99% |
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分子量 | 靈敏性高,特異性強 | 分子式 | 免費代測 |
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 48T/ 96T |
貨號 | LB-4062741 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業 |
主要用途 | 科研使用,不得用于臨床診斷 | 品牌 | 自營品牌 |
規格 | 48T/96T | 保存條件 | 2-8℃ |
主要用途 | 科研使用,不得用于臨床診斷 | 應用領域 | 醫療衛生,環保,化工,生物產業,農業 |
供應周期 | 現貨 |
山羊胰島素(INS)酶聯免疫吸附測定試劑盒 |
免疫測定技術的基礎在于抗原抗體之間的特異結合反應,所以任何優質的診斷試劑離不開優質的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標記物如酶標結合物則通過各種化學合成方法制備。近年來,隨著分子生物學的發展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結合物等免疫測定試劑幾成為現實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現。
山羊胰島素(INS)酶聯免疫吸附測定試劑盒 |
在進行酶聯免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)實驗中,有很多需要注意的地方,由于ELISA方法廣泛應用在各種抗原和抗體的此定中。但是測定中的影響因素很多,并且對操作有較高的要求,所以,在實驗中除了正常的相互反應,還會出現錯誤的反應,導致錯誤的結果。
而造成這種錯誤的可能因素有:標本因素;試劑因素;操作因素等。
為此,上海勁馬針對常見問題做分析如下:這里我簡單的總結一下:
ELISA 試劑盒標準操作要點
無論在什么研究中,優質的試劑、良好的和正確的操作是保證ELISA 檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA 中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應為新鮮的和高質量的純化水電導率小于1.5μs/cm。
樣品活化方法
生物樣品中的通常以無活性的形式存在,在檢測指標活性前必須進行活化處理。
活化方法如下:
血清、血漿: 280 μL標準品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品,混勻,加入40 μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40 μL活化試劑2,混勻后立即檢測。
注意:樣品被稀釋了10倍!
細胞培養上清:20 μL標準品&樣品稀釋液中加入100 μL樣品,混勻,加入40 μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40 μL活化試劑2,混勻后立即檢測。
注意:樣品被稀釋了2倍!
組織勻漿:1960 μL標準品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品,混勻后檢測。
注意:樣品被稀釋了50倍!
精密度
板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
批內變異系數 | 批間變異系數 | |||||
樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
數量 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
平均值( MERGEFIELD 單位ng/mL) | 0.41 | 1.07 | 4.96 | 0.47 | 1.25 | 4.24 |
標準差 | 0.02 | 0.05 | 0.22 | 0.03 | 0.06 | 0.2 |
變異系數 (%) | 4.88 | 4.67 | 4.43 | 6.38 | 4.8 | 4.72 |
回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍和平均回收率。
樣本類型 | 回收率范圍 (%) | 平均回收率 (%) |
血清(n=5) | 94-110 | 102 |
血漿(EDTA)(n=5) | 90-102 | 96 |
細胞上清(n=5) | 95-106 | 98 |
線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍,4倍,8倍,16倍做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。
血清(n=5) | 血漿(EDTA)(n=5) | 細胞上清(n=5) | ||
1:2 | 回收率范圍(%) | 99-108 | 95-105 | 92-104 |
平均回收率(%) | 105 | 102 | 97 | |
1:4 | 回收率范圍(%) | 95-109 | 90-100 | 97-105 |
平均回收率(%) | 102 | 96 | 100 | |
1:8 | 回收率范圍(%) | 89-103 | 89-104 | 96-108 |
平均回收率(%) | 97 | 97 | 102 | |
1:16 | 回收率范圍(%) | 88-102 | 98-108 | 92-105 |
平均回收率(%) | 94 | 104 | 100 |
試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用試劑盒,請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 |
說明書 | 1份 | 1份 |
封板膜 | 2片 | 2片 |
密封袋 | 1個 | 1個 |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 |
標準品 | 0.3ml×6管 | 0.3ml×6管 |
酶標試劑 | 5 ml×1瓶 | 10 ml×1瓶 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
終止液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
20×濃縮洗滌液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 |
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 |
說明書 | 1份 | 1份 |
封板膜 | 2片 | 2片 |
密封袋 | 1個 | 1個 |
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