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意義：Acetyl-CoA 廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中。是生物體能源物質代謝過程中產生的一種重要的中間代謝產物。在體內能源物質代謝中是一個樞紐性的物質。糖、脂肪、蛋白質三大營養物質通過乙酰輔酶 A匯聚成一條共同的代謝通路-三羧酸循環和氧化磷酸化，經過這條通路*氧化生成二氧化碳和水，釋放能量用于 ATP合成。此外，Acetyl-CoA  是合成脂肪酸，酮體，膽固醇及其衍生物等生理活性物質的前體物質。

原理：蘋果酸脫氫酶可催化蘋果酸和 NAD 生成草酰乙酸和 NADH。檸檬酸合酶可催化乙酰輔酶 A 和草酰乙酸生成檸檬酸和輔酶 A。利用蘋果酸脫氫酶和檸檬酸合酶的偶聯反應，乙酰輔酶 A 含量和 NADH 的生成速率成正比，340nm 下吸光值的上升速率反應了乙酰輔酶 A 含量的高低。