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全自動細胞計數儀在單細胞測序中的應用如下
閱讀：356 發布時間：2023-1-28
全自動細胞計數儀是一種基于經典臺盼藍染色法原理開發的細胞計數分析儀，集成了*的光學成像技術和智能圖像識別技術，可以快速準確地測量細胞濃度和細胞活力，為細胞計數人員提供方便，消除了繁瑣的過程，血細胞計數板引起的時間長、誤差大等問題。
目前，全自動細胞計數儀廣泛應用于各種科學研究活動，包括癌癥、免疫學、傳染病、干細胞、臨床試驗以及農作物和家禽疾病預防研究。同時，它還廣泛涉及醫療領域、生物制藥、細胞治療、工業生產和農業生產。
全自動細胞計數儀的計數方法：
1、臺盼藍染色法：
臺盼藍染色是分別計數死亡細胞和活細胞的方法之一。染色的原理是臺盼藍無法穿透活細胞的完整細胞膜，因此活細胞不被染色；然而，死亡細胞的細胞膜被破壞，染料通過細胞膜在細胞中富集，使細胞變藍。然而，臺盼藍染色可能無法準確區分有核細胞和細胞碎片，因此它傾向于低估細胞總數并高估細胞生存能力。
2、熒光細胞計數法：
吖啶橙/碘化丙啶染色原理：活細胞通過AO染色發出綠色熒光，而死細胞通過PI染色發出紅色熒光。重要的是，對于具有復雜背景的細胞，例如外周血單核細胞，具有更多細胞片段或簇的細胞數量可以避免檢測到細胞片段。這種方法最近也被應用于單細胞基因組學，其中綠色對應于完整的細胞，紅色對應于成功分離的細胞核。該策略允許研究人員計算未裂解的剩余細胞在細胞總數中的百分比，并計數細胞核以指示樣品質量，幫助研究人員確定是否繼續單細胞基因組學過程。
全自動細胞計數儀在單細胞測序中的應用如下：
單細胞基因組學技術目前正在全面應用，如單細胞RNA測序和染色質轉座酶可及性測序。與對大量細胞進行測序的傳統方法相比，單細胞基因組學技術突出了細胞之間的差異，這有助于更深入地了解樣本材料。例如，scRNA-seq可以比較健康和患病狀態的轉錄譜，而ATAC-seq可以解釋染色質的可及性及其對基因表達的影響。
然而，這些研究都需要對分離的細胞核進行精確計數，因為文庫制備需要少量未裂解的細胞，并且樣品中沒有細胞團塊和碎片。此外，許多單細胞基因組學技術需要完整的細胞核才能正常工作。