BD Pharmingen白細胞活化混合物試劑通過細胞內染色檢測細胞因子的細胞內積累的最關鍵步驟是分離和激活細胞群以誘導產生目標細胞因子。如果沒有在蛋白質轉運抑制劑存在下培養(yǎng)的適當激活的產生細胞因子的細胞，在大多數情況下檢測細胞因子細胞內積累的能力會受到嚴重損害。據報道，刺激細胞產生細胞因子的各種體外方法。多克隆激活劑對于誘導產生細胞因子的細胞特別有用。這些激活劑包括：伴刀豆球蛋白 A、脂多糖、佛波酯加鈣離子載體或離子霉素、植物血凝素、葡萄球菌腸毒素 B 和針對 TCR/CD3 復合物亞基的單克隆抗體（有或沒有針對共刺激受體的抗體，如 CD28）。

含BD Pharmingen白細胞活化混合物試劑是一種即用型多克隆細胞活化混合物，含有佛波酯、PMA（佛波醇 12-肉豆蔻酸酯 13-乙酸酯）、鈣離子載體（離子霉素）和蛋白質轉運抑制劑 BD GolgiPlug™ （Brefeldin A）。這種混合物可用于從 T 細胞引發(fā)原發(fā)性細胞因子反應。使用這種混合物刺激細胞導致細胞因子產生，細胞因子位于產生細胞因子的細胞的粗面內質網中。細胞因子的這種定位是由蛋白質轉運抑制劑成分 Brefeldin A 引起的，它阻斷了細胞內蛋白質轉運過程。因此，細胞中細胞因子蛋白水平積累的增加增強了免疫熒光染色和流式細胞術分析對產生細胞因子的細胞的可檢測性。每 100 μL 樣品瓶的內容物足以處理多達 50 mL 的細胞培養(yǎng)物（~10^6 個細胞/mL）;因此可以刺激 ≥ 5 × 10^7 個細胞。

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