一、材料

1. 緩沖液、溶液和試劑

丙酮

蒸餾水

干冰

磷酸鹽緩沖液（PBS)

Tek OCT 組織復(fù)合物（Sakura FinetekUSA，Torrance，CA)

2. 特殊設(shè)備

封閉容器

燒杯

恒冷裝置

解剖工具

平盤

可以削去的一次性組織模子（Pelco International，Redding，CA)

普通的無粘片劑的載玻片

Sakura 刀片（IMEB，SanMarcos，CA)

3. 細胞和組織

新鮮的組織（見二、方法中的（2））

二、方法

1. 冷凍組織的準備

(1) 蓋上盛有包埋介質(zhì)的模子（推薦使用 Tek O C T 組織復(fù)合物），準備干冰-丙酮浴(在燒杯中簡單混合干冰和丙酮）。

(2) 處死動物并取出目的組織與包埋介質(zhì)混合。

(3) 放組織于冷模子底上。為了便于利用恒冷裝置，反向放目的切面于冷模子底上。

(4) 將冷模子的底部放于干冰-丙酮浴的表面，這樣樣品將在 3~4 min 內(nèi)逐漸冷卻。當品冷凍后將呈現(xiàn)白色。在冷凍時不要將模子掉入丙酮中。

(5) 從模子中移去組織，放于-80°C 直到切片。如果組織樣品放置時間較長，將其放盛有冷的蒸餾水的密封容器中以保持濕度。

2. 切片及保存

(1) 取冷凍的樣品置于含 O C T 復(fù)合物的低溫冷箱中，采用標準的冷凍組織切片法。

(2) 讓樣品與冷箱中溫度（-25~-20°C) 平衡 15~20 min。如果樣品在切片時組織塊太冷，平衡時間可以適度延長。

(3) 將準備用于 LCM 的切片（厚度 1~5um) 放于普通的無粘片劑的載破片上。如果組織粘于載玻片上太緊，可能不利于后續(xù)的 LCM 操作。

(4) 放置好后，立即放到干冰上。如果當天做 LCM，片子應(yīng)當放在干冰上。否則，應(yīng)儲存于-80°C。

深圳安培生物科技有限公司，是一家具有核心的技術(shù)實力、壹流的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)。總部設(shè)在廣東，服務(wù)面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學的發(fā)展提供壹流的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、信號傳導(dǎo)和神經(jīng)科學等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線，在各個領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供世界前沿水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品，安培生物致力于為廣大的科研機構(gòu)、高等院校等優(yōu)質(zhì)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。

性做久久久久久坡多野结衣-性做久久久久久久久浪潮-性欲影院-性影院-国产精品线路一线路二-国产精品兄妹在线观看麻豆

冷凍組織及切片的準備

會員登錄

收藏該商鋪

提示