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武漢原生原代生物醫藥科技有限公司

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NR8383大鼠肺泡巨噬細胞

參  考  價: 1800

訂  貨  量: ≥1 瓶

具體成交價以合同協議為準

產品型號:

品       牌:PriCells/原生原代

廠商性質:生產商

所  在  地:武漢市

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更新時間:2021-10-25 14:04:14瀏覽次數:345次

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供貨周期 一周 規格 1 × 10^6 細胞數/1ml
應用領域 醫療衛生,化工,生物產業 主要用途 科研
NR8383大鼠肺泡巨噬細胞介紹
NR8383 (正常大鼠,1983年)來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞。細胞在gerbil肺細胞連續培養液存在下培養了大約8-9個月。隨后,不再需要外源生長因子。

NR8383大鼠肺泡巨噬細胞

細胞介紹

NR8383 (正常大鼠,1983年)來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞。細胞在gerbil肺細胞連續培養液存在下培養了大約8-9個月。隨后,不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個細胞克隆并亞克隆NR8383細胞,并三次用軟瓊脂亞克隆。細胞表現出巨噬細胞的特性,吞噬酵母多糖和銅綠,非特異性脂酶活性,Fc受體,氧化降解;分泌IL-1, TGF-β和IL-6,可重復地響應外源生長因子。NR8383細胞響應博萊霉素,分泌TGF-β前體。在博萊霉素刺激下,TGF –β mRNA表達也上升。細胞對內毒素敏感。1-10 鈉克/毫升的LPS水平抑制增生達50%。 即使達到0.001毫克/毫升的水平,LPS抑制還是無毒且在后續過程中可逆的。NR8383細胞株提供了高響應的肺泡巨噬細胞的均一來源,可以用于體外研究巨響細胞相關活性。


細胞特性

1) 來源:肺;巨噬細胞 

2) 形態:巨噬細胞,半懸浮生長

3) 含量:>1x10^6  細胞數

4) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5) 用途:僅供科研使用。


NR8383大鼠肺泡巨噬細胞

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。


細胞接收后的處理

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。

2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3)半貼細胞和貼壁不牢(懸?。┘毎篢25瓶置于37℃培養箱中約2-3h,顯微鏡下觀察細胞的情況,若細胞密度在60%以下,客戶需收集T25瓶中的懸浮細胞離心后用*培養基重懸后打回到原培養瓶中繼續培養,若細胞生長70%-90%對細胞進行傳代,傳代時需要收集培養基中懸浮的細胞離心后回收。

4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1:2傳代 。


一.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備 F12K 培養基 (推薦:0007),優質胎牛血清15 %,GlutaMAX-1谷氨酰胺 ( 0900 ) 1 %,P/S 1%

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。


二. 細胞處理:

1)凍存細胞的復蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL*培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,*培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml*培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達70%-90%,即可進行傳代培養。


該細胞輕微貼壁和懸浮培養的細胞,傳代可以參考以下方法:

1. 收集:將培養瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。由于細胞貼壁不牢PBS潤洗后細胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。

3. 將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min,棄去上清,補加1-2mL培養液后重懸混勻后將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3) 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。


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