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小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞概述和運(yùn)輸保存說明

時(shí)間:2022-1-25 閱讀:572
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  小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)形成的主要功能細(xì)胞。神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中,當(dāng)程序性細(xì)胞死亡時(shí),或在大腦發(fā)育的過程中,中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時(shí),神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細(xì)胞。膠質(zhì)細(xì)胞能在II類組織相容性復(fù)合體表達(dá)CD-4陽性T細(xì)胞時(shí)表達(dá)抗原,能進(jìn)行Fc介導(dǎo)的巨噬作用,并且與造血細(xì)胞和巨噬細(xì)胞組織共享抗原。
  小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞采用胰酶消化制備而來。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseBrainPrimaCell?:NormalNerveMicrogliaCatNo.3-4428)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞(如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等)的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞傳5代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
  小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞運(yùn)輸和保存:
  1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
  2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
  培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
  1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
  2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
  3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

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