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P7003-pAC5.1b-EGFP蛋白表達質粒
  • P7003-pAC5.1b-EGFP蛋白表達質粒
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更新時間:2025-05-08 21:00:08

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pAC5.1b-EGFP蛋白表達質粒
啟動子Ac5
復制子pUC
終止子SV40 poly(A) signal
質粒分類昆蟲系列質粒;昆蟲游離質粒;昆蟲胞內質粒
質粒大小6072bp
質粒標簽N-EGFP,C-V5,C-6×His
原核抗性Amp
真核抗性無
克隆菌株DH5α
培養條件37℃
表達宿主果蠅細胞系S2
誘導方式組成性表達,無需誘導

注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態名稱和培養溫度。
1、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質粒,室溫放置1min;

2、從-80冰箱中取出相應的感受態,置于冰盒上解凍,并做好標記;

3、取2μl質粒加至100μl感受態中,冰浴30min

442熱激90s,再冰浴2min

5、加入900μl無抗的LB液體培養基,180rpm震蕩培養45min;

6、6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8、將平板正向培養1h,再倒置培養12h~16h;

9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養基中,震蕩培養12h~16h,根據實驗需要提取質粒

 

pFastBac-GST-N蛋白表達質粒
pFastBacHTB蛋白表達質粒
pFastBacHTA蛋白表達質粒
pAC5.1b-EGFP-V5-6×His蛋白表達質粒
pAC5.1b-EGFP-2蛋白表達質粒
pAC5.1b-EGFP蛋白表達質粒
pLKO.1-shTAZ基因沉默質粒

 

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