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一、載體構建的基本實驗步驟
(1)目的DNA片段和載體的制備；
(2)目的DNA片段和載體的連接；
(3)連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化；
(4)克隆篩選。
(5)測序驗證及結果交付

二、詳細內(nèi)容
1、以PCR擴增為基礎的各類載體構建，如大腸桿菌表達載體、酵母表達載體、桿狀病毒表達載體、哺乳動物表達載體；報告基因載體等；
2、基因定點突變，包括單點突變，多點突變，基因缺失等；
3、載體元件替換和改造；
4、siRNA載體和miRNA表達載體構建；
5、過表達載體構建。

pLVshRNA-U6-PPARG(mouse)-shRNA1-EF1a-ZsGreen(2A)Puro基因沉默質(zhì)粒

pLVX-HDAC3(human)-shRNA2-PGK-Puro基因沉默質(zhì)粒

pLVX-U6-CD274(human)-shRNA2-PGK-Puro基因沉默質(zhì)粒

pLVX-U6-CD274(human)-shRNA3-PGK-Puro基因沉默質(zhì)粒

pLVX-HDAC3(human)-shRNA1-PGK-Puro基因沉默質(zhì)粒

pLentiCRISPRV2-NF2(human)-sgRNA1基因編輯質(zhì)粒

pLVX-HDAC3(human)-shRNA3-PGK-Puro基因沉默質(zhì)粒

pLKO.1-EGFP-Puro-MYC(human)-shRNA2基因沉默質(zhì)粒

pLKO.1-EGFP-Puro-MYC(human)-shRNA1基因沉默質(zhì)粒

pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-FKBP1A(human)-shRNA2基因沉默質(zhì)粒

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