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| 一、細胞基本屬性 | |
| 細胞名稱 | 絨猴EBV轉化的白細胞 |
| 細胞別稱 | B95-8; B95.8; B 95.8; B 95-8; B-95-8; B958; GM07404; GM07404D |
| 細胞貨號 | SNL-026 |
| 細胞種屬 | 絨猴 |
| 生長情況 | 懸浮 |
| 培養條件 | 1640+10%FBS+1%雙抗 |
| 培養環境 | air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% |
| 二、細胞培養操作 | |
| 換液周期 | 2-3天 |
| 培養基體積 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 傳代比例 | 1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定） |
| 傳代方法 | 1.混勻細胞，收集細胞培養基，900rpm離心3-5min，棄上清； 2.加新的*培養基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養瓶里； 3.補足*培養基，將培養瓶放回培養箱靜置培養； |
| 注意事項 | 部分懸浮細胞會附著瓶底，輕輕晃動培養基或者吹打細胞面就會脫落，不需要胰酶消化。建議使用培養皿培養，更適合吹打細胞操作，吹打細胞注意盡量輕柔，不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態。 |
| 三、細胞凍存操作 | |
| 凍存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養基+8%DMSO(高手推薦); |
| 凍存規格 | 200-300萬/ml，1ml每管 |
| 凍存方法 | 1. 離心獲得細胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞； 2. 將細胞懸液盡快移入已經做好標記的凍存 3. 將凍存管轉入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉入-80度過夜，第二天轉入液氮保存 |
| 注意事項 | 凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時調整實驗方案 |
Tips：
1.細胞懸浮圓形生長，聚團或分散生長；
2.圓形透亮、細胞膜完整的細胞是活細胞，如果無法判斷，可以取少量細胞用臺盼藍染色后計數確定細胞活率；
3.懸浮細胞密度維持1E5-5E5/ml之間，密度過低或者過高可能會影響細胞狀態；
我們推薦使用尚恩生物B95-8（絨猴EBV轉化的白細胞）zhuan用*培養基（產品貨號：SNLM-026）作為體外培養B95-8（絨猴EBV轉化的白細胞）的培養基。
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