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微生物質(zhì)譜鑒定微生物的基本流程
閱讀：3188 發(fā)布時(shí)間：2022-6-23
微生物質(zhì)譜一般由進(jìn)樣系統(tǒng)、離子源、質(zhì)量分析器、檢測(cè)器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等部分組成。由于進(jìn)樣方式、離子源、質(zhì)量分析器等的不同，質(zhì)譜儀分為不同的種類(lèi)，臨床上常見(jiàn)的有液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（LC－MS－MS）、氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（GC－MS－MS）、電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP－MS）、基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI－TOFMS）等等。
微生物質(zhì)譜質(zhì)譜分析是一種通過(guò)測(cè)量離子質(zhì)荷比（質(zhì)量－電荷比），從而確定其質(zhì)量的分析方法，通俗點(diǎn)講，質(zhì)譜就是一種類(lèi)型的“秤”，只不過(guò)它稱(chēng)量的是離子的質(zhì)量，在眾多的分析測(cè)試方法中被認(rèn)為是一種同時(shí)具備高特異性和高靈敏度且得到了廣泛應(yīng)用的普適性方法。
用一定強(qiáng)度的激光照射樣品與基質(zhì)形成的共結(jié)晶薄膜，基質(zhì)從激光中吸收能量，與樣品之間發(fā)生電荷轉(zhuǎn)移使得樣品分子電離。離子在高壓電場(chǎng)作用下加速進(jìn)入飛行管中，小離子飛得快，先到達(dá)探測(cè)器，大離子飛得慢，后到達(dá)探測(cè)器，從而得出測(cè)定結(jié)果。
鑒定微生物基本流程是，將微生物純培養(yǎng)后，點(diǎn)靶加釋放液，微生物經(jīng)過(guò)釋放液充分處理后，可使得細(xì)胞內(nèi)的蛋白成分更好地釋放出來(lái)，待溶劑揮發(fā)后加基質(zhì)，蛋白分子與基質(zhì)形成基質(zhì)結(jié)晶，上質(zhì)譜檢測(cè)。
在質(zhì)譜儀中，樣品通過(guò)有效的電離將不同質(zhì)荷比（m／z）的離子分開(kāi)形成微生物特異性的清晰的指紋圖譜，通過(guò)分析關(guān)鍵的質(zhì)譜峰數(shù)據(jù)，與數(shù)據(jù)庫(kù)中的已知菌種譜圖進(jìn)行比對(duì)，即可快速得到微生物鑒定結(jié)果。