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熟悉熒光顯微鏡的工作原理

閱讀:370      發布時間:2025-4-26
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熒光顯微鏡是一種利用熒光現象進行觀察的特殊光學顯微鏡,在生命科學、醫學、材料科學等領域發揮著重要作用。

熒光顯微鏡利用被稱為熒光的自然現象。在熒光顯微鏡下,通過激發樣品內部的某些細胞結構或者分子等,使他們進入到激發態,當它們回到基態時,會釋放出可見光區的光,通過放大并檢測此熒光來生成圖像。因為熒光只從被激發的分子發射出來,所以它可以提供高度選擇性的成像能力。

工作原理:

1、激發熒光:使用特定波長的光照射樣本,樣本中的熒光物質吸收激發光能量后躍遷至高能級狀態。

2、發射熒光:處于激發態的熒光物質不穩定,返回基態時發射出波長更長的熒光。

3、濾光成像:通過激發濾光片確保特定波長激發光照射樣本,阻擋濾光片僅允許熒光信號到達觀察者,配合暗視野背景形成高對比度圖像。

熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學的基本工具。它是由光源、濾板系統和光學系統等主要部件組成。是利用一定波長的光激發標本發射熒光,通過物鏡和目鏡系統放大以觀察標本的熒光圖像。

功能:

1、熒光標記觀察:對細胞內特定分子進行熒光標記,實時監測其動態變化。

2、高對比度成像:暗視野背景與熒光信號形成強反差,可分辨微弱熒光信號。

3、多模態成像:支持明場、暗場、微分干涉、偏光等多種觀測模式切換。 

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