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| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | T25培養瓶x1 1.5ml凍存管x2 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BFN60804796 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
| 主要用途 | 僅供科研 |
細胞名稱 | 人肥大細胞LAD2 |
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貨物編碼 | BFN60804796 | ||
產品規格 | T25培養瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研 1類 | ||
培養體系 | DMEM高糖培養基+10%FBS+1%三抗 | ||
培養溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 人肥大細胞LAD2取自男性供體 | ||
注釋 | Characteristics: KITLG dependent. Doubling time: ~14 days (DOI=10.1016/j.jaci.2018.12.550). Derived from sampling site: Bone marrow. | ||
STR信息 | / | ||
參考文獻 | PubMed=12801524; DOI=10.1016/S0145-2126(02)00343-0 Kirshenbaum A.S., Akin C., Wu Y., Rottem M., Goff J.P., Beaven M.A., Rao V.K., Metcalfe D.D. Characterization of novel stem cell factor responsive human mast cell lines LAD 1 and 2 established from a patient with mast cell sarcoma/leukemia; activation following aggregation of FcepsilonRI or FcgammaRI. Leuk. Res. 27:677-682(2003)
DOI=10.1016/j.jaci.2013.12.226 Kirshenbaum A.S., Petrik A., Walsh R., Vepa S., Metcalfe D.D. Worldwide impact Of LAD2 mast cell line on mast cell biology research. J. Allergy Clin. Immunol. 133 Suppl. 1:AB57-AB57(2014)
PubMed=25195635; DOI=10.1159/000365729 Kirshenbaum A.S., Petrik A., Walsh R., Kirby T.L., Vepa S., Wangsa D., Ried T., Metcalfe D.D. A ten-year retrospective analysis of the distribution, use and phenotypic characteristics of the LAD2 human mast cell line. Int. Arch. Allergy Immunol. 164:265-270(2014)
DOI=10.1016/j.jaci.2018.12.550 Kirshenbaum A.S., Yin Y., Sundstrom J.B., Bandara G., Metcalfe D.D. Characterization and comparison of human LAD1 mast cells with human LAD2 mast cells. J. Allergy Clin. Immunol. 143 Suppl. 1:AB180-AB180(2019)
PubMed=31698677; DOI=10.3390/ijms20225520 Kirshenbaum A.S., Yin Y., Sundstrom J.B., Bandara G., Metcalfe D.D. Description and characterization of a novel human mast cell line for scientific study. Int. J. Mol. Sci. 20:5520.1-5520.9(2019) | ||
驗收細胞注意事項
1、收到人肥大細胞LAD2，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。
2、收到人肥大細胞LAD2，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態時，請不要打開細胞培養瓶，應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止 3-5 小時左右，讓細胞先穩定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到人肥大細胞LAD2后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時 血清濃度可以加到 15％去培養。若細胞迏到 80%左右 ，血清濃度還是在 10％。
4、收到人肥大細胞LAD2時如無異常情況 ，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養基吸出，留下 5-10ML 培養基繼續培養：超過 80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液，1000 轉/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
5、將培養瓶置于 37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時之需。
6、24 小時后，人肥大細胞LAD2恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養瓶里的培養基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般 1-3 分鐘，不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入 3-5ml 培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞 ，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液，37℃，5%CO2 培養。
特別提醒： 原瓶中培養基不宜繼續使用，請更換新鮮培養基培養。
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