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Wako:線粒體DNA提取試劑盒—mtDNA Extractor® CT Kit

時間:2024/12/9閱讀:1141
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本產品是可在短時間內提取哺乳動物組織以及細胞內的線粒體DNA(mtDNA)的試劑盒。此外,還可用于從復合飼料中提取mtDNA。


◆特點
● 只需少量組織樣品(5 mg),即可提取適用于PCR反應的mtDNA。
從50 mg組織(250 mg骨骼肌)中提取的mtDNA可通過瓊脂糖凝膠電泳確認。
所提取的mtDNA純度高,后續可用于PCR和限制性內切酶酶切分析。
可從冷凍組織中提取mtDNA。
無需添加如苯酚、氯仿等有機溶劑。

◆原理
1. 通過離心從細胞裂解液中獲得線粒體斷片。
2. 為除去線粒體斷片中的基因組DNA,本試劑盒采用質粒DNA純化中的堿-SDS方法,通過使基因組DNA堿發生變性并沉淀析出后,回收mtDNA(環狀DNA)。
3. 使用碘化鈉令混入的蛋白質等變為可溶性物質,再通過洗滌緩沖液純化mtDNA。

◆試劑盒組成
1. Buffer for Homogenate(勻漿緩沖液)
2. DNA Extraction Solution 1
3. DNA Extraction Solution 2(A)
4. DNA Extraction Solution 2(B)
5. DNA Extraction Solution 3
6. 碘化鈉溶液
7. 洗滌液

◆實驗流程
Wako:線粒體DNA提取試劑盒—mtDNA Extractor® CT Kit

◆實驗示例
從小鼠的新鮮組織以及冷凍組織中提取mtDNA

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Wako:線粒體DNA提取試劑盒—mtDNA Extractor® CT Kit

從小鼠的新鮮組織中提取的mtDNA,取其中一半用Pst l處理,通過瓊脂糖凝膠電泳進行確認。
Wako:線粒體DNA提取試劑盒—mtDNA Extractor® CT Kit

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

從小鼠的冷凍組織中提取的mtDNA,取其中一半用Pst l處理,通過瓊脂糖凝膠電泳進行確認。

◆使用過程中的注意事項
由于使用本試劑盒提取的mtDNA量較少,因此需要通過GelRed™ 染色才能在凝膠上被檢測出來。本試劑盒無法用于溴化乙錠染色檢測。

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