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HPLC蒸發光散射檢測器的原理

閱讀:1014        發布時間:2021-2-24

HPLC蒸發光散射檢測器的原理

簡介

 

蒸發光散射檢測器(Evaporative Light Scattering Detector)設計用于高效液相色譜系統,分析任何揮發性低于流動相的化合物。ELSD的應用范圍包括:碳水化合物,藥物,脂類,甘油三脂,未衍生的脂肪酸和氨基酸,聚合物,表面活化劑,營養滋補品,及組合分子庫等。

 

蒸發光散射檢測器消除了常見于其他HPLC檢測器的問題。示差檢測受溶劑前沿峰的干擾使得分析復雜化,并且由于對溫度極其敏感使得基線很不穩定,與梯度洗脫不相容。另外,示差檢測器的響應不如ELSD靈敏。而低波長紫外檢測器在急變梯度條件下受基線漂移的困擾,并要求被分析化合物帶有發色團。ELSD則不受這些限制。不同于這些檢測器,ELSD能在多溶劑梯度的情況下獲得穩定的基線,使得分辨率更好、分離速度更快。另外,因為ELSD的響應不依賴于樣品的光學特性,所以ELSD檢測時樣品不要求帶有發色團或熒光基團。

 

操作原理

 

蒸發光散射檢測器的*檢測原理為,首先將柱洗脫液霧化形成氣溶膠,然后在加熱的漂移管中將溶劑蒸發,后余下的不揮發性溶質顆粒在光散射檢測池中得到檢測。

 

步驟1:霧化

 

 

 

霧化

 

經HPLC分離的柱洗脫液進入霧化器,在此與穩定的霧化氣體(一般為氮氣)混合形成氣溶膠。氣溶膠由均勻分布的液滴組成,液滴大小取決于分析中采用的氣體流量。氣體流量越低形成的液滴越大,液滴越大則散射的光越多,從而提高了分析靈敏度,但是越大的液滴在漂移管中越難蒸發。每種方法均存在產生優質的信號噪音比率的優化氣體流量。流動相流速越低要求適當霧化的氣體流量也越低。用內徑為2.1mm的微徑柱代替內徑為4.6mm標準型分析柱,能大大降低流動相流速,因而提高分析的靈敏度。

 

步驟2:蒸發

 

 

 

蒸發

 

氣溶膠中揮發性成分在加熱的不銹鋼漂移管中蒸發。為特定應用設置適當的漂移管溫度,取決于流動相組成和流速,以及樣品的揮發性。高有機含量流動相比高含水量流動相要求蒸發的漂移管溫度低。流動相流速越低比流動相流速越高要求蒸發的漂移管溫度越低。半揮發性樣品要求采用較低的漂移管溫度,以獲得靈敏度。溫度需要通過觀察各溫度時的信號噪音比率來確定。

 

步驟3:檢測

 

 

 

檢測

 

懸浮于流動相蒸汽中的樣品顆粒從漂移管進入到光散射檢測池。在檢測池中,樣品顆粒散射激光光源發出的光而蒸發的流動相不散射。散射光被硅光電二極管檢測,產生電信號輸送模擬信號輸出端口,被用于模擬輸出的數據采集。

HPLC蒸發光散射檢測器的原理

 

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