Dnmt1 Chromobody Immunodetection Vector
這些微小的融合蛋白由衍生自重鏈駱駝科動物抗體的抗原結合域（VHH）遺傳融合至熒光蛋白（例如，來自Evrogen的TagGFP或TagRFP）組成，可以在培養(yǎng)的細胞內(nèi)內(nèi)源性表達。與常規(guī)抗體不同，這些創(chuàng)新的熒光納米探針適用于實時分析，并且可以可視化活細胞中的細胞結構和過程。

Dnmt1 Chromobody Immunodetection Vector

Dnmt1 Chromobody Immunodetection Vector

 

Dnmt1染色體體的小尺寸可產(chǎn)生高信噪比，以產(chǎn)生令人震驚的高分辨率圖像或染色質(zhì)甲基化動力學的定時電影。值得注意的是，它對甲基化模式?jīng)]有影響，并且在大多數(shù)細胞類型中均表現(xiàn)出極低的毒性。只需用Dnmt1 Chromobody質(zhì)粒轉(zhuǎn)染您選擇的細胞系即可。該質(zhì)粒包含與TagRFP或TagGFP（Evrogen）融合的Dnmt1特異性羊駝抗體的序列。轉(zhuǎn)化后，您的細胞將表達Dnmt1染色體抗體。由于熒光體分子特異地定位于DNA甲基轉(zhuǎn)移酶，因此細胞核將發(fā)出擴散和點狀的熒光。

Dnmt1染色體在細胞中的實時可視化

用Dnmt1-Chromobody質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HeLa細胞，并在生長和分裂過程中對其進行觀察。每30分鐘對細胞成像24小時。抗Dnmt1-TagRFP染色體抗體將DNA甲基轉(zhuǎn)移酶與細胞核結合。在G期細胞中，信號通過細胞核和細胞質(zhì)均勻分布。隨著時間的流逝，在S期，顆粒以復制灶的形式出現(xiàn)在細胞核中，后顆粒消失，細胞分裂。

在整個細胞周期中，Dnmt1-Chromobody轉(zhuǎn)染HeLa細胞的靜態(tài)圖像。這次，使用抗Dnmt1-TagGFP融合蛋白，隨著細胞通過S期，復制灶的形成可以看成亮綠色的點。Dnmt1-Chromobody不影響正常細胞功能。

染色體將您的細胞變成免疫報告工廠

納米抗體是*的小抗體片段，表現(xiàn)出與靶蛋白的超高效結合。在動物細胞中表達的納米抗體可以被收集并用于體外研究。當納米抗體表達為與報告分子（例如GFP）的融合體時，發(fā)生了一些出乎意料的事情。新形成的染色體抗體直接與目標細胞內(nèi)的靶標結合。而且，使用正確的載體和啟動子，結合具有高特異性和低背景。這為GFP-融合與感興趣的蛋白質(zhì)的免疫定位研究提供了*的選擇。為什么？因為已經(jīng)顯示了GFP和RFP融合可以阻斷或改變?nèi)诤系鞍椎幕钚浴Ｏ喾矗?/p>